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冷冻等离子体聚焦离子束扫描电镜助力高质量冷冻薄片的制备

时间:2024-06-06      阅读:38

冷冻等离子体聚焦离子束扫描电镜(Cryo-PFIB)是一种结合了冷冻技术、等离子体技术和聚焦离子束扫描电镜(FIB-SEM)的先进成像和制备工具。主要用于生命科学领域,特别是细胞或组织内部结构的观察。它基于聚焦离子束扫描电镜(FIB-SEM)的原理,结合冷冻技术,使得在保持样品接近天然状态的同时,进行高分辨率的三维结构成像。

Thermo Scientific Arctis 冷冻等离子体聚焦离子束扫描电镜专为从玻璃化细胞中自动、高通量制备冷冻薄片而设计。其自动上样系统在断层扫描工作流程中冷冻聚焦离子束扫描电镜样品制备和冷冻透射电镜 (cryo-TEM) 这2个步骤间建立了直接的联系。
  

与光学显微镜术关联以及在透射电镜中重新定位

机载集成宽场荧光显微镜 (iFLM) 支持使用光束、离子束或电子束对同一样品区域进行观察。特别设计的 TomoGrids 确保从最初的铣削到高分辨率透射电镜成像过程中,冷冻薄片能与断层扫描倾斜轴始终正确对齐。

iFLM 关联系统能够在电子束和离子束的汇聚点处进行荧光成像。无需移动载物台即可在 iFLM 靶向和离子铣削之间进行切换。CompuStage 的 180° 的倾转功能实现对样品的顶部和底部表面进行成像,有利于观察较厚的样品。

TomoGrids 是针对冷冻断层扫描工作流程而特别设计的,其上下2面均是平面。这2个面可防止载样到冷冻透射电镜时出现对齐错误,并始终确保薄片轴相对于透射电镜倾斜轴的正确朝向。利用 TomoGrids,整个可用薄片区域都可用于数据采集。

厚度一致的高质量薄片 

Arctis 冷冻等离子体聚焦离子束扫描电镜可在多日内保持超洁净的工作环境,确保制备一致的高质量薄片。等离子体离子束源可在氙离子、氧离子和氩离子间进行切换,有利于制备表面质量出色的极薄薄片。

Arctis 冷冻等离子体聚焦离子束扫描电镜的紧凑型样品室专为冷冻操作而设计。由于缩小了样品室体积,操作环境异常干净,最大限度减少水凝结的发生。通过编织套管冷却样品及专用冻存盒屏蔽样品,进一步提升了设计带来的清洁度,确保了可以进行多日批量样品制备的工作环境。

自动化高通量样品制备和冷冻断层扫描连接性

自动上样器可实现多达 12 个网格(TomoGrids 或 AutoGrids)的自动上下样,方便转移到冷冻透射电镜,同时最大限度降低样品损坏和污染风险。通过新的基于网络的用户界面加载的载网将首先被成像和观察。随后,选择薄片位置并定义铣削参数。铣削工作将自动运行。根据样品情况,等离子体源可实现高铣削速率,以实现对大体积材料的快速去除。

 

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