【转发】实时荧光定量PCR和梯度PCR 有什么区别?
时间:2024-04-10 阅读:496
梯度PCR是指你的PCR仪在设置的时候可以同一时间不同位置设置一个从高到低的温度梯度,以便在不知道退火温度的情况下选择一个最适宜的退火温度。
二实时荧光定量PCR是通过再PCR过程中掺入荧光染料或释放荧光基团,从而对模板进行相对定量或绝对定量的实验,在实时荧光定量PCR时也可以设置梯度。
总的来说实时荧光定量PCR是一种实验方法,而梯度PCR是一种实验手段。
原理:
1、常规PCR 技术:
对PCR 扩增反应的终点产物进行定量和定性分析无法对起始模板准确定量,无法对扩增反应实时检测。
2、实时定量PCR技术:
利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化,通过Ct 值和标准曲线的分析对起始模板进行定量分析