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Waters Symmetry色谱柱的清洗、再生和存放

时间:2024-10-22      阅读:221

Waters Symmetry色谱柱清洗与再生:

如果发生峰形改变、峰分叉、出现肩峰、保留时间改变、分离度变化或柱压升高,说明色谱柱可能已被污染。通常情况下,用纯有机溶剂进行冲洗(小心避免缓冲液出现沉淀)就足以去除污染物。如果冲洗不能解决问题,可采用以下清洗和再生步骤灌注色谱柱。请根据样品和/或您认为污染色谱柱的物质的性质,选择与之匹配的常规清洗方法(见表1)。用20倍柱体积(例如对于4.6 × 250 mm色谱柱,使用80 mL溶剂)HPLC级溶剂冲洗色谱柱。将流动相温度升至35 °C~55 °C可以提高清洁效率。如果清洗和再生之后色谱柱性能仍然很差,请联系我公司。

表1:色谱柱清洗溶剂使用顺序和其他选项

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保护柱需要根据样品污染情况定期更换。当系统背压稳步上升至设定压力限值时,通常表明需要更换保护柱。突然出现分叉峰也表明需要更换保护柱。

Waters Symmetry色谱柱存放:

为了尽可能延长色谱柱寿命和提高性能,使用色谱柱之后请用100乙腈保存保存色谱柱。请wu使用含缓冲液或盐的水性流动相保存色谱柱。如果流动相洗脱液中含有酸/碱性添加剂、缓冲液或盐,请先用至少10倍柱体积(常用色谱柱的柱体积见表2)HPLC级水冲洗色谱柱,再用至少15倍柱体积HPLC级100乙腈冲洗色谱柱,然后再储存。如果不执行这些步骤,可能导致缓冲盐在色谱柱内沉淀。使用随附的端塞wan全密封色谱柱,防止溶剂蒸发导致柱床变干。

表2.空色谱柱体积(mL)(乘以10得到冲洗溶剂体积)

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注:如果色谱柱运行了含甲酸盐(如甲酸铵、甲酸等)的流动相,并且之后使用100乙腈进行冲洗,那么在重新安装色谱柱并再次运行含甲酸盐的流动相时,柱平衡花费的时间可能略长。


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