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硅胶色谱柱的使用方法

时间:2024-04-07      阅读:270

硅胶因其优良的机械强度和表面易改性等特征,已成为应用广泛的色谱柱填料。硅胶柱具有柱效高、选择性好及分析速度快等特点,因而被广泛用于分离极性小分子如药物,而用于糖、肽或蛋白质分离较少。
 
硅胶色谱柱是一种常用的分离柱,适用于化合物的分离和纯化。下面介绍硅胶色谱柱的使用方法:
1.准备工作
将硅胶色谱柱安装在色谱系统中,先用纯溶剂进行预洗,以去除任何可能残留在色谱柱中的杂质。
2.样品制备
将样品溶解在适当的溶剂中,使其浓度达到适当的浓度,以便在色谱柱中进行分离。同时,需要去除可能影响分离的杂质。
3.进样
将样品注入到色谱柱项端的进样口中,注意不要将空气泡进入色谱柱中。
4.洗脱
通过向色谱柱中注入一一 系列不同极性的溶剂,让样品在硅胶层中进行分离。通常情况下,极性较低的溶剂先行通过,随着溶剂极性的逐渐增加,样品分离出来的时间也会有所不同。
5.收集和检测
在分离过程中,将分离出来的化合物收集起来,进行后续的检测和分析。
6.清洗
在结束实验后,需要使用纯溶剂对硅胶色谱柱进行清洗,以便下次再次使用。
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