大部分小鼠ELISA试剂盒检测均以血清为标本。

1.血清标本可按常规方法采集，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以HRP 为标记的小鼠ELISA试剂盒测定中，如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。

2.一般说来，在5 天内测定的血清标本可放置于4℃，标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合，使间接法的试剂本底加深。

3.超过一周测定的需－20℃保存。冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀并避免产生气泡。

4.混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再检测。

5.反复冻融会使抗体效价跌落，所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存。

6.保存血清自采集时就应注意无菌操作，也可加入适当防腐剂。

7.抗凝不完-全的标本因纤维蛋白原的干扰而造成假阳性，建议尽量不用抗凝血尤其是肝素抗凝剂。

8.加样时应将所加物加在小鼠ELISA试剂盒板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出。

9.在建立小鼠ELISA试剂盒方法作反应动力学研究时，实验表明，两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2 小时，产物的生成可达顶-峰。

10.为避免蒸发，板上应加盖，小鼠ELISA试剂盒也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔，反应板不宜叠放，以保证各板的温度都能迅速平衡。

11.应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。

12.由于公司的ELISA试剂盒温育是在空气浴中完成，采用水浴会造成值偏高或花板。

13.另外温育中还有边缘效应，边上的值会偏高，建议为了客观的判断结果，将质控放在非边缘位置。