如何正确使用厌氧培养箱进行微生物培养?
时间:2024-10-16 阅读:221
使用厌氧培养箱进行微生物培养需要遵循以下步骤和注意事项:
1. **准备工作**:
- 确保厌氧培养箱放置在干燥、通风、无振动的地方,并连接好气源、电源。
- 消毒并清洁培养箱内外表面,准备好培养基和待培养的细胞或微生物。
2. **操作室厌氧环境形成**:
- 根据使用要求放置好必要的配件和器具,并向操作室内放入无毒塑料袋。
- 开启电源,打开温度控制器,并调节所需的温度。
- 操作室内放入钯粒(封闭)和干燥剂,并放入美兰指示剂(封闭)。
- 关紧取样室内外门,并进行真空检查。
- 进行至少三次的气体置换,第一次和第二次通常使用氮气,第三次使用混合气体(如N2:H2:CO2 = 85%:10%:5%)。
3. **催化脱氧**:
- 打开钯粒除氧剂,接通除氧催化器电源进行催化除氧。
- 一小时后打开美兰指示剂观察其变色,以确认操作室内达到厌氧环境。
4. **灭菌处理**:
- 开启紫外线灭菌灯,对室内进行灭菌处理,灭菌时间自定。
5. **菌种的置入和培养**:
- 检查并关闭取样室的门。
- 将菌种放入取样室后,打开取样室的外门并关闭外门。
- 取样室充满氮气并更换三次,确保厌氧条件。
- 接种棒灭菌器的应用,使用镍铬电热丝使电极短路,以致变红进行灭菌。
6. **操作过程中的注意事项**:
- 在操作前,必须关闭厌氧培养箱门,并检查是否密封。
- 使用手套或消毒操作口进行操作。
- 不要在厌氧培养箱内抽烟或使用火源等可能引起爆炸的物品。
- 定期检查氧气、氢气和二氧化碳气体浓度,避免漏气。
7. **停止使用**:
- 停止使用后,将培养箱内残留的气体*全排除,并对培养箱进行清洁和消毒。
遵循这些步骤和注意事项,可以确保在厌氧培养箱中正确地进行微生物培养。