目前，将外源 DNA 导入哺乳动物细胞的方法大致可分为两大类，即生物方法和物理化学方法。生物方法主要以病毒作为载体，通过病毒感染的方式将外源 DNA 导入到细胞中，其中以逆转录病毒及腺病毒转染系统最为常用。物理化学方法中常用的有磷酸钙法、脂质体介导的转染、显微 注射、电穿孔，以及最近出现的以高分子聚合物为载体的基 因传递技术。其中常用的是化学方法，磷酸钙、聚乙烯亚胺（PEI）、脂质体等化学试剂较为常用，那么接下来着重探讨一下PEI转染试剂的作用原理及比较吧。

PEI转染试剂的作用原理

使用广泛的阳离子聚合物转染试剂是PEI。PEI制备简单，价格便宜，有线状和枝状两种商业试剂可选。自19世纪 70年代发现PEI可以结合DNA质粒，直到20年后，PEI才真正用于哺乳动物细胞转染，成为非常有潜力的非病毒质粒载体试剂。由于PEI带正电荷，与带负电荷的DNA结合形成带正电荷的PEI-DNA复合物，可以与带负电荷的细胞表面结合。PEI-DNA复合物通过胞吞作用进入细胞内部形成内涵体，之后一部分从内涵体中逃逸进入细胞核内，未逃逸的进入溶酶体被降解，无法入核的DNA会在100min内被胞浆中的DNA酶降解（如下图）。每毫升转染试剂和质粒混合物形成约1×1010个DNA/PEI复合物，大小为300nm左右。经过15min孵育，转染时每个细胞进入约250个 DNA/PEI 复合物。

不同 PEI 的比较

枝状的800kD PEI是shou次报道的可用于多种细胞转染的试剂，枝状的25kD PEI（25B）用于HEK293细胞大规模瞬时转染，其转染效率较枝状2kD、600kD、800kD 或线状22kD PEI（22L）的高。 之后比较了枝状70kD、50 ~ 100 kD、25kD PEI和线状25 kD PEI（25L），结果表明25B和25L的转染效率较高，适合于哺乳动物细胞转染，但是 25L比25B更适用于悬浮哺乳动物细胞HEK293和CHO转染。

polysciences转染试剂

成立于1961年的美国Polysciences公司，是一家历史久远的化学品制造公司，产品广泛应用于各个科研领域。Polysciences在PEI的制造工艺上具有长达20多年的经验，其经典的PEI产品系列包括研究级产品PEI 25K，PEI MAX和Transporter 5，以及cGMP级MAXgene GMP（Figure 1），被广泛用于抗体药物和重组蛋白，临床等级慢病毒和AAV病毒的大规模生产，为全球客户提供成本效益高、供应稳定和质量可靠的选择。在过去10年期间，相关产品已被用于国内外多项临床申报。

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