DTT已用于：

DL-二硫苏糖醇试剂作为牛奶中主要过敏原αs1-酪蛋白的还原和烷基化反应物之一。

DL-二硫苏糖醇试剂作为精子去膜和再激活培养基的一个组分。

因硫醇可有效保护生物催化剂的活性位点而维持酶的稳定性。

作为还原剂用于测试N-乙基马来酰亚胺与巯基反应的特异性。

用于将 −SH 基保持在还原态的试剂；定量还原二硫化物。在 SDS-PAGE 前，DTT 在样品缓冲液中可有效还原蛋白二硫键。DTT 还可用于还原交联剂 N,N′-双(丙烯酰)胱胺的二硫键桥以分解聚丙烯酰胺凝胶基质。DTT 的刺激性和毒性都低于 。通常，使用 DTT (100mM) 所需的浓度是使用  (5% v/v, 700mM) 的浓度的七分之一。

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