ELISA试剂盒中几大要点影响非特异性显色的
时间:2024-04-19 阅读:163
ELISA试剂盒中几大要点影响非特异性显色的
影响ELISA试剂盒中非特异性显色的缘由许多,如试剂盒特异性、查验标本中含酶符号物的烦扰物,操作进程中的疑问。这篇文章就这一缘由作一简明剖析,以便能够经过以上办法把非特异显色降限,然后行进检测的特异性,并得到更精确、牢靠的试验作用。
查验标本中富含酶符号物的烦扰物
内源性烦扰物:类风湿因子(RF)、黄疸等,类风湿因子是可作用于多种动物以及人IgGFc段的本身抗体,大都为IgM类,能充任抗原成分与固相及酶标抗体反响,然后出现非特异性显色。
黄疸血标本中常富含内源性过氧化物酶,如用辣根过氧化物酶为符号物,就有能够发作非特异性显色。
外源性烦扰物,常常因样品收集、储存、处置不妥构成如样品溶血,被细菌污染,标本凝聚不全等。溶血标本,红细胞溶解割裂,释放出血红素构成,而血红素中的铁卟啉是过氧化物酶的类似物,以HRP为符号的ELISA测定中,溶血标本能够会添加非特异性显色。
如有细菌污染,菌体中能够富含内源性HRP,有国内报导酶免HAg试剂检测溶血标本时可构成假阳性。如在冰箱中保管过久,其间的IgG可发作聚合,在直接法ELISA试剂盒中可使本底加深。因而,血标本在收集处置时应留心,在冰箱中保管不易过久。