GPC凝胶净化系统的使用注意细节
时间:2024-11-07 阅读:79
GPC凝胶净化系统是一种高效的分离纯化工具,广泛应用于科学研究和工业领域。为了确保其性能稳定、数据准确,操作人员必须遵循一系列严格的操作规范和维护流程。将详细介绍GPC凝胶净化系统的使用方法和日常维护注意事项。
一、流动相的准备与使用
1. 流动相纯度要求:建议使用色谱纯及以上级别的流动相(如乙酸乙酯:环己烷=1:1或二氯甲烷)。流动相的纯度直接影响到分析结果的准确性和重现性。
2. 配置流动相:根据凝胶净化色谱柱上的标签规格要求配置相应的流动相。对于特定标签的凝胶色谱柱,应严格按照规定的流动相比例进行配置,避免使用不合适的流动相对色谱柱造成损害。
3. 过滤与脱气:流动相应使用0.45微米的滤膜过滤,并超声脱气混合均匀。这一步骤能够有效去除流动相中的杂质和气泡,保证系统的正常运行。
4. 适量配制:由于方法中的流速为5mL/min,如果实验样品数量较多,应一次性配好充足的流动相,避免在实验过程中添加。中途添加流动相易产生气泡,导致基线不稳定。
二、样品处理
1. 样品溶剂选择:在选择样品溶剂时,应尽量选择与流动相极性相符的溶剂,推荐使用流动相作为样品溶剂。这有助于减少样品对凝胶色谱柱的影响,提高分离效果。
2. 样品过滤:样品在进样前必须经过0.45微米微孔膜过滤,以防止颗粒物进入系统,堵塞色谱柱或损坏仪器。
三、系统操作
1. 开机准备:将仪器及电脑各部分电源打开,待检测器自检通过后(约2分钟),再打开工作站软件。确保所有连接正常,通讯成功。
2. 清洗与平衡:点击工作站主界面左边的【手动控制】,选择【GPC信息】窗口,点击【馏分】,输入注射泵体积“8” mL,点击【清洗】。完成后,设置输液泵流量为5 mL/min,点击【运行】。色谱柱平衡时间一般为30分钟,若长期未使用则需要适当延长平衡时间。
3. 方法查看与批表编辑:在【方法管理】中查看方法参数,新建批表并选择运行方法。确保所有设置正确无误后,再进行样品分析。
四、日常维护
1. 输液泵压力监控:如发现控制面板上的输液泵压力变大或报警停泵,需将仪器的放空滤片座卸下来用流动相超声清洗10~20分钟后再安装使用。
2. 长时间不用时的保养:若长时间不使用GPC凝胶系统,请先用对应的流动相将凝胶色谱柱冲洗10~20分钟,然后取下并用聚四氟堵头将其两端封好。下次使用时再重新安装,并用流动相冲洗十分钟以上,使其基线达到平稳后再使用。
3. 管路清洗:若使用GPC仪器做茶叶等颜色较深的样品,当回收率降低时,每隔半个月将凝胶净化色谱柱拆下来,用不锈钢两通替代柱子连接管路,把流动相换成甲醇:丙酮(1:1),冲洗管路一个小时,然后换回流动相冲洗二十分钟,再把凝胶柱安装上继续使用。
4. 保护柱(预柱)清洗:当回收率降低时,如有保护柱(预柱),用甲醇:丙酮(1:1),低流速反向冲洗二十分钟。
5. 废液处理:及时处理废液瓶,避免废液过满而流出造成的污染。
6. 自动液体处理器维护:在使用过程中不要随便移动或变更样品盘上的样品架,以防进样针折断等事故发生。实验结束后,尽可能做一些防尘措施,以延长其使用寿命。
五、实验结束后的操作
实验结束后,请点击工作站左侧下方的【手动操作】按钮,选择【GPC信息】项,点击【输液泵】中的【停止】按钮,关闭输液泵后,再关闭工作站,最后分别将仪器及电脑的电源关闭。