安捷伦1260液相色谱仪操作的注意事项
时间:2024-07-26 阅读:353
(一)运行环境要求
安捷伦1260液相色谱仪的运行环境要求是为了仪器的正常合理运转及其保养,应该将仪器放置在平稳固定的台面上,要求台面无振动,周围磁场。“要保持干净无灰尘,仪器工作的温度大致范围要求是在15~30℃,周边空气的相对湿度在30%~80%之间”。另外,因为流动相大多数是有机溶剂,我们还要保持室内有一些排风扇等通风换气的设施设备。
(二)开机维护
首先检查检测使用的流动相以及色谱柱是否准确无误,然后再打开仪器的稳压电源,而后再开输液泵、柱箱。设置好色谱柱的大保护柱压,进行排气工作,并要确保流路时不会有气泡。这是因为气泡会扩大基线的噪声率,造成安捷伦1260液相色谱仪灵敏度不断下降,如果有气泡,气泡里的氧气还会氧化仪器组件,影响机器的性能指标。而关于流速切不可操之过急,我们应该从小到大一点点地加速,这样是为了更好地保护色谱柱。与此同时,还要注意仔细观察,观察柱压与流速能否保持相对应的平稳和合理增加,待到流速已经达到所需要的流速并终让柱压稳定之后,然后再让检测器工作,这样有利于延长检测器的使用寿命。
(三)柱前维护
由于临床上的样本多为较为复杂的混合物,而这些填料都是很细小的,并且色谱柱的内腔容积非常小,这就会导致堵塞现象。同样,溶液里的细小微粒也会加大进样阀、泵头内的蓝宝石活塞杆和活塞的堵塞和磨损概率。安捷伦1260液相色谱仪用缓冲盐的时候,缓冲盐溶液会产生高压析盐情况,会产生一些小的盐粒,这些盐粒会附着在活塞杆上,并会随着活塞杆运动,这就很容易使仪器产生划痕现象,磨损仪器中的密封垫,从而产生漏液等问题。使用梯度比例阀时,当盐溶液与有机溶剂溶液混合时,盐溶液能够实现与有机溶液有效重新融合并不会出现沉淀现象。假如在比例阀的混合点上,由于重力的因素使盐颗粒慢慢沉淀下来,通常阀A接水相盐溶液,D接有机溶剂,此连接法可有效使盐回落到盐溶液中并被溶解。但是,假若把这个连接法颠倒过来,这些盐可能落在有机溶剂之中,从而容易出现问题。因此,当使用缓冲盐溶液和有机溶剂时,建议要将缓冲盐的通道接在A通道上,而将有机溶液的通道直接接在D通道上。
(四)关机维护
实验完成后,要把色谱柱冲洗干净。首先要去完成的就是关掉检测器,之所以要这样做是为了节约光源,保证仪器灯的有效使用年限。另外,还要切断色谱柱与检测器的连接程序,之所以这样是为了防止污染检测池。用流动相冲洗流路30多min,然后再用15%的甲醇水洗10min左右,后再用纯甲醇冲30min左右,并用一些纯化水同时冲外流路等地方。输液泵的流速应慢速减小到0时,才可关闭泵和稳压器。“反相系统用90%~95%有机相+10%~5%水相封存反相色谱柱”,两端封死。如长时间存放可将柱子*浸泡在有机相内,以防用纯有机相封存反相色谱柱,如果长期保存有机相会挥发。