qPCR的内参,你选对了吗
时间:2024-12-20 阅读:32
什么是内参基因?
内参基因,也称为管家基因,即是内部参照,它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测基因的表达水平变化时常用它来做参照物。所以叫内参基因。其作用是校正上样量、上样过程中存在的实验误差,保证实验结果的准确性。借助检测每个样品内参的量就可以用于校正上样误差,这样半定量的结果才更为可信。一般要选择一个在处理因素作用的条件下不会发生表达改变的基因作内参。常用的内参基因包括GAPDH、β-actin、18 sRNA、28sRNA、B2M、ACTB、SDHA、HPRT1、ARBP内参基因等。
在相对定量检测中,最重要的是选择合适的内参基因;而选择合适的内参基因中,最重要的,则是实验内参基因在不同处理间的表达稳定性。选择合适的内参,是相对定量成功的开端!