细胞名称：小鼠成纤维细胞NCTC clone 929ATCC

细胞代次：P4

细胞规格：T25瓶（包邮）/2冷冻管（需加干冰运输费）

细胞冻存：无血清冻存液

细胞传代：第一次建议1:2

1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：

取出25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态，然后换用新鲜*培养液继续培养或进行传代。

2、细胞传代：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；

2）添加0.25%Y蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入*培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；

3）弃上清，沉淀细胞用12ml*培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，zui后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；

4）待细胞*贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。

3、细胞冻存：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；

2）添加0.25%Y蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入*培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；

3）用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；

4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。

4、细胞复苏：

1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；

2）将冻存管中的细胞移至含5ml*培养基的15ml离心管中， 1000rpm离心5min；

3）弃上清，沉淀用5ml*培养基重悬，接种25cm2培养瓶，于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；

4）第二天，换用新鲜*培养基继续培养。

原代细胞与细胞系有什么区别？细胞培养物来源于原代外植体或分散的细胞悬液。通常在这样的培养物中细胞增殖形成汇合地单层细胞或密集地细胞悬液。根据传统定义，*次收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 这类细胞生命周期有限，在有限的生命周期内需掌握好细胞zui大的生长空间，以保持细胞群中基因型和表型的*性。细胞系是不断生长，分化的细胞群，因其经过遗传改造，致使其具有无限增长的潜能。体外生长的细胞系用于医疗或科研。实际上，连续细胞系可以用大量次培养基培养，随着代数的增加细胞的基因型和表型都有可能发生改变。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。

1、倍增和代数有什么区别？倍增是培养物中细胞总数加倍，通常是指细胞指数或对数生长期。代数是指细胞群从培养瓶中移出，传代培养过程的次数，传代培养的目的是使细胞处于低密度以刺激其进一步生长。

2、接收到的冻存细胞该如何处理？收到包装箱后，立即将冻存细胞从干冰移入液氮中冻存。此过程尽量快以避免升温。不要将细胞储存在-80℃，这样会对细胞造成不可挽回的伤害。

3、有多少经验才能开始正常人类细胞培养？推荐有经验者在无菌环境下用层流净化罩工作，如果有经验的话对其它细胞类型也是很有利的。如果你是细胞培养的初学者或打算建立细胞培养实验室，我们会为你提供帮助。请的细胞培养专家。

售后服务告知书

1）细胞出现问题，可重发的情况有哪些？判定标准是什么？

1. 细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等，重发；

2. 细胞污染问题，请在收到产品48小时内，给我们提出真实的实验结果，核实后重发；

3. 常温发货的细胞静置24小时后，干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后，绝大多数细胞未存活，（需提供真实清晰的细胞状态照片），重发；

4. 干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后或常温发货的细胞静置4小时候并且未开封，出现污染，重发；

5. 细胞活性问题，请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果，用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，核实后予重发；

6. 细胞收到当天以及第2,3天请拍照，3天未告知的，视为产品合格。4-7天内出现问题有提供收到细胞前3天照片和细胞出现问题时照片以及细胞相关操作的详细步骤的，并跟技术人员沟通的，由技术人员判定为我方责任的，重发。技术人员判定为双方承担责任的由双方进行协商处理或者按合同价的50%收费重发。

二）细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？

1. 客户造成细胞污染，不重发；

2. 客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；

3. 非本库推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；

4. 细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；

5. 细胞培养时经其它处理的，不重发；

6. 细胞收到2天内，未告知，不重发；

7. 视具体情况而定。

YS4153C人急性骨髓性白血病细胞KG-1

YS4154C人弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞Toledo

YS4155C人淋巴瘤细胞BC-3

YS4156C人黑色素瘤细胞MeWo

YS4157C人T淋巴瘤细胞SUP-T1

YS4158C人食管上皮细胞Het-1A

YS4159C人乳腺癌细胞AU565

YS4160C人成神经瘤细胞-骨髓SK-N-DZ

YS4161C人乳腺上皮细胞DU4475

YS4162CALK 阳性间变性大细胞淋巴瘤SU-DHL-1

YS4163C人肺腺鳞癌细胞NCI-H596

YS4164C人乳腺导管癌细胞BT-483

YS4165C人乳腺导管癌细胞HCC1500

YS4166C人盲肠癌细胞LS411N

YS4167C人细支气管肺泡癌细胞NCI-H1781

YS4168C人非小细胞肺癌细胞NCI-H1581

YS4169C人卵巢癌细胞UWB1.289+BRCA1

YS4170C人大脑内皮细胞HBEC-5i

YS4171C人多发性骨髓瘤细胞HuNS1

YS4172C人支气管上皮样细胞HBE135-E6E7

YS4173C人肺微血管内皮细胞HULEC-5a

YS4174C弥漫型大b细胞淋巴瘤细胞DB

YS4175C源于293，包病毒做转录，两性转录2A

YS4176C人卵巢透明细胞癌细胞ES-2

YS4177C人胚肺成纤维细胞MRC-5

YS4178C人B细胞非霍奇金淋巴瘤细胞RL

YS4179C人脾细胞MD

YS4180C人B淋巴瘤细胞RC

YS4181C人主动脉内皮细胞TeloHAEC

YS4182C小鼠皮下结缔组织细胞L-WRN

YS4183C小鼠小肠内分泌细胞系STC-1

YS4184C人胚肾细胞293T/17 SF

YS4185C小鼠肾系膜细胞RMC

YS4186C小鼠肾小管上皮细胞TCMK-1

YS4187C大鼠正常肾成纤维细胞NRK-49F

YS4188C正常人肠上皮细胞HIEC-6

YS4189C人纤维肉瘤细胞SW 684

YS4190C人逆转录病毒包装细胞系Phoenix-ECO

YS4191C人舌鳞状细胞癌BICR3

YS4192C人食管癌细胞OE19

YS4193C人结直肠肿瘤成纤维细胞CAF05HUMAN COLORECTAL TUMOR CAFS（CAF05）

YS4194C小鼠结肠癌细胞 CT26.WT

YS4195C小鼠成纤维细胞NCTC clone 929

YS4196C小鼠成纤维细胞L Wnt-3A

YS4197C大鼠甲状腺髓样癌细胞CA-77

YS4198C小鼠血管内皮瘤细胞EOMA

YS4199C小鼠恶性乳腺癌细胞Py230

YS4200C人胃癌细胞SNU-620

YS4201C人胃癌细胞SNU-601

YS4202C鳞状细胞癌，扁平上皮癌细胞SNU-1066

YS4203C鳞状细胞癌，扁平上皮癌细胞SNU-46

YS4204C人黑色素瘤细胞MNT-1

YS4205C小鼠胚胎成纤维细胞3T3-L1

YS4206C稳定表达RspoI蛋白的293T细胞HA-R-Spondin1-Fc 293T cells

YS4207C霍奇金淋巴瘤细胞Hs 611.T