细胞计数板的原理和使用方法
时间：2024-09-20 阅读：247
一、细胞计数板的原理
细胞计数板是一种用于对细胞进行计数的工具。它通常由一块特制的载玻片和一个盖玻片组成。载玻片上刻有精确的方格网，通过显微镜观察，可以对位于方格内的细胞进行计数。
计数板的计数原理基于一定体积的细胞悬液在计数区域内的分布情况。计数板上的方格被设计成特定的尺寸，使得在已知的体积范围内，可以通过计数方格内的细胞数量来推算出细胞悬液的浓度。
二、细胞计数板的使用方法
- 准备工作
准备细胞计数板、盖玻片、移液器、细胞悬液等。
确保计数板和盖玻片清洁、干燥，无划痕。
- 制备细胞悬液
将待计数的细胞样品制备成均匀的细胞悬液。可以通过轻轻吹打、搅拌或使用适当的分散剂来确保细胞均匀分散。
- 加样
使用移液器吸取适量的细胞悬液，小心地滴加在计数板的计数区域上。注意不要产生气泡，也不要让液体溢出计数区域。
通常在计数板的两侧分别滴加细胞悬液，然后轻轻盖上盖玻片，使其与计数板紧密贴合。
- 显微镜观察
将计数板放在显微镜的载物台上，使用适当的物镜进行观察。一般使用低倍物镜（如 10×）找到计数区域，然后切换到高倍物镜（如 40×）进行细胞计数。
- 计数细胞
计数板上通常有两种类型的方格：大方格和小方格。大方格又被分为多个小方格。
计数时，只计数位于大方格四个角和中央的中方格内的细胞。对于压线的细胞，只计数上侧和左侧线的细胞，避免重复计数。
分别计数不同区域的细胞，取平均值以提高计数的准确性。
- 计算细胞浓度
根据计数板的规格和计数的细胞数量，可以计算出细胞悬液的浓度。
例如，如果计数板上一个大方格的体积为 0.1mm³，计数了 5 个大方格内的细胞总数为 N，则细胞浓度（个 /mL）=N×10⁴。
- 清洗和保存
计数完毕后，及时清洗计数板和盖玻片，避免细胞残留影响下次使用。
将计数板和盖玻片干燥后，存放在清洁、干燥的地方。