Thermo培养箱的灭菌步骤主要分为准备阶段、执行阶段和结束阶段。以下是详细的操作步骤：

一、准备阶段

1. 清空培养箱
   在进行灭菌之前，首先将培养箱内的所有样品、器皿、架子等物品取出。清空培养箱可以确保灭菌过程并避免损坏实验材料。

2. 清洁内部表面
   使用无菌的擦拭布和中性清洁剂（或者根据培养箱说明使用适当的清洁液）对培养箱内壁、架子、托盘进行清洁。确保去除任何明显的污垢或污染物。

3. 检查水盘
   清空和清洁水盘，确保灭菌时水盘内没有残留的水或其他物质。湿度盘中的残余水分可能在灭菌过程中蒸发，导致湿度变化影响灭菌效果。

4. 确保设备正常运行
   在开始灭菌前，检查培养箱的电源、显示屏和功能键是否正常工作。如果设备存在硬件故障或异常，应在维修后再执行灭菌程序。

二、执行阶段

1. 进入灭菌模式
   打开培养箱的控制面板，找到并选择“灭菌模式（Sterilization Mode）”或“紫外灭菌（UV Sterilization）”功能（视具体型号功能有所不同，如i160具有自动紫外灭菌功能）。根据用户手册，按下相应按钮，启动灭菌程序。

2. 选择灭菌程序
   某些Thermo培养箱可能提供多种灭菌程序选项。一般包括紫外灭菌、高温灭菌或两者结合。选择适合您实验需求的灭菌方法：

• 紫外灭菌：利用紫外灯照射培养箱内壁进行无菌处理，适合日常快速灭菌。

• 高温灭菌：通过提高培养箱内部温度进行杀菌，一般适用于细菌或真菌污染风险较大的情况下。

3. 设定灭菌时间
   根据污染情况设定适当的灭菌时间，通常为30分钟到几个小时不等。紫外灭菌通常时间较短，而高温灭菌需要更长的时间来杀死顽固的细菌或真菌。

4. 启动灭菌程序
   按“启动”按钮，开始灭菌过程。灭菌程序开始后，培养箱将自动进入消毒状态。在此期间，避免开启培养箱门以确保灭菌效果。部分设备会在显示屏上显示灭菌进度。

三、结束阶段

1. 灭菌完成
   灭菌程序结束后，培养箱会自动恢复正常状态。此时可以通过显示屏或指示灯确认灭菌是否成功。如果设备带有报警功能，灭菌完成时通常会有提示音或视觉提示。

2. 清理灭菌残留
   灭菌后，再次检查培养箱内部是否有残留的污垢或消毒过程中产生的任何杂质。用干净的无菌布轻轻擦拭内壁，保持干净无污染。

3. 恢复正常设置
   重新调整培养箱的温度、湿度、CO₂浓度等参数至实验需求，确保灭菌后培养箱可以正常继续使用。

4. 重新放置样品
   在确保培养箱温度和CO₂浓度恢复正常后，将实验样品、培养皿和其他物品重新放入培养箱，准备下一步实验操作。

注意事项：

• 确保无人员暴露于紫外线下：如果选择紫外灭菌，操作时应避免眼睛或皮肤直接接触紫外线，以防损伤。

• 定期灭菌：建议根据实验需求定期执行灭菌程序，尤其是在实验中有污染或敏感细胞培养时。

• 灭菌后通风：高温灭菌后，建议让培养箱内部通风一段时间，排出多余的热量和气体，以免影响下次实验。

通过遵循这些步骤，可以确保Thermo培养箱内部的无菌状态，有效避免污染问题，保障实验的可靠性和安全性。