关于高效液相色谱仪的那些繁琐操作
时间:2022-08-22 阅读:214
1、流动相不抽滤超声
因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀,因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。流动相最好在玻璃容器内抽滤,可采用水系滤膜(0.22μm或0.45μm)等滤器,然后超声15min以上去除液体当中的微小气泡。泵的入口都应连接砂滤棒(或片),输液泵的滤器应经常清洗或更换。
2、仪器运行之前没有排气泡
液相最害怕进入气泡,不仅影响泵的正常运转,进入色谱柱后,还会影响流动相的流速和流量,引起基线的起伏不稳定。因此液体进入储液瓶之前得排气泡,上机之后也得排气泡才能正常运行进入色谱柱。
3、使用后没有及时清洗泵
流动相不应含有任何腐蚀性物质,含有缓冲液的流动相不应保留在泵内,尤其是在停泵过夜或更长时间的情况下。如果将含缓冲液的流动相留在泵内,由于蒸发或泄漏,甚至只是由于溶液的静置,就可能析出盐的微细晶体,这些晶体将和上述固体微粒一样损坏密封环和柱塞等。因此,必须泵入纯水将泵充分清洗后,再换成适合于色谱柱保存和有利于泵维护的溶剂(对于反相键合硅胶固定相,可以是甲醇或甲醇-水)。
4、流动相走空
泵工作时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完,否则空泵运转也会磨损柱塞、缸体或密封环,最终产生漏液。