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GPC凝胶净化中如何判断样品纯度?

时间:2023-07-03      阅读:634

   GPC凝胶净化是一种基于体积排阻的分离技术,通常用于样品的净化。在GPC凝胶净化中,样品被流动相溶剂通过一个色谱柱,柱内填充有凝胶颗粒。样品的纯度可以通过以下几个因素来判断:
 
  1.紫外-可见吸收光谱(UV-Vis):GPC柱中的凝胶颗粒通常是非吸光的,因此,样品的UV-Vis吸收光谱可以提供有关样品纯度的信息。如果样品在紫外区域有明显的吸收峰,这可能表明样品中存在有吸光的杂质。如果样品在紫外区的吸收非常弱,那么样品可能更纯。
 
  2.凝胶渗透色谱图:GPC图显示了样品在不同时间通过色谱柱的流出情况。通过GPC图,可以观察到样品在柱内的分离情况以及是否存在杂质峰。如果GPC图上的峰形尖锐且对称,并且只有一个显著的峰值,那么样品可能较为纯。如果出现多个峰值或者峰形不对称,这可能表明样品中存在杂质。
 
  3.折射率(RI):折射率是通过GPC技术测量的一种关键参数。它提供了一种间接的纯度指示,通过比较样品的RI值与标准品的RI值进行判断。如果样品的RI值与标准品的RI值非常接近,那么样品可能较为纯。
 
  4.多角度激光散射(MALS):MALS是一种直接测量样品分子大小的技术,可以提供样品的分子量和分布。通过与标准品的分子量进行比较,可以判断样品的纯度。如果样品的分子量分布与标准品的分子量分布非常接近,那么样品可能较为纯。
 
  5.高效液相色谱(HPLC):如果需要更深入的分析,可以使用HPLC对GPC净化后的样品进行进一步的分析。HPLC可以提供关于样品中各组分的详细信息,包括各组分的保留时间、峰形和紫外吸收等。如果HPLC图上的峰形尖锐且只有一个显著的峰值,那么样品可能较为纯。
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