二维液相色谱系统操作时会遇到哪些故障
时间:2024-10-14 阅读:319
二维液相色谱系统是一种高效、高灵敏度的分离分析技术,广泛应用于复杂样品的分离和纯化。然而,在实际操作过程中,二维液相色谱系统可能会遇到多种故障,影响实验的正常进行和结果的准确性。以下是对常见故障及其解决方法的描述:
1. 压力异常
- 压力过高:压力突然升高通常是由于流路中有堵塞的情况。首先检查溶剂过滤头是否堵塞,可以通过用30%的硝酸浸泡或用超纯水冲洗来处理。如果问题仍然存在,可能是色谱柱出口端堵塞,需要用强流动相冲洗柱子,或者考虑更换柱子入口筛板。
- 压力过低:压力过低的现象一般是由于系统泄漏或泵内进入了空气。检查各个接口处是否有泄漏,并确保泵内没有空气,可以通过打开Purge阀以3~5ml/min的流速冲洗来排除气泡。
2. 漂移问题
- 基线漂移:机器启动时基线容易漂移,通常需要30分钟的平衡时间。如果实验过程中发现基线漂移,可能是由于缓冲溶液或缓冲盐的使用,或者是在低波长下的平衡时间过长。
- 保留时间漂移:保留时间的变化可能是由于流动相的组成变化、色谱柱的化学性质变化、色谱柱温度或流速变化等原因引起的。
3. 峰形异常
- 峰形问题:在做液相色谱过程中,峰形问题是常见的问题。对于不同的异常峰,需要区别对待,通过调整不同的条件来改善不好的峰形。
4. 泵的问题
- 单向阀污染或阀内进入气泡:这会导致柱压波动范围很大。处理方法包括使用不同极性的溶剂冲洗,或者拆下进出单向阀放在10%的硝酸液内超声清洗。
- 塞杆密封垫磨损:在高压下压力不稳定,从泵头渗漏流动相液体,需要更换密封垫。
5. 进样系统问题
- 手动进样器:检查是否有渗漏,通常是由于污染使转子磨损或用尖头的针扎进手动进样器,划伤了转子。
- 自动进样器:针密封垫损坏或针污染都可能导致进样量不准确,需要进行清洁或更换。
6. 检测器问题
- UV灯能量降低:停泵监测基线出现短噪音信号并伴有偶尔的长噪音尖信号,需要更换新灯。
- 池内气泡:滞留在池内的气泡使基线一直向一边漂移且伴有毛刺,可以通过与泵出口直接相连,以2~3mL/min的流速冲洗数分钟来解决。
7. 漏夜问题
- 漏夜导致压力偏低或无压力:检查哪个模块漏夜报错,清除错误后重新启动泵排查该模块漏夜位置,未配有漏夜感应器的可以逐个接口排查。