采用柱后TFA-Fix 技术降低流动相中TFA对多肽质谱信号抑制作用
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赛默飞色谱及质谱 -
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581次引言 在反相色谱分离多肽和蛋白质的实验中,使用 (TFA) 作为离子对试剂是常见的手段,流动相中的(TFA)通过与疏水键合相和残留的极性表面以多种模式相互作 用,来改善峰形、克服峰展宽和拖尾问题。同时反相色谱 与电喷雾质谱联用已成为多肽和蛋白质的分子量测定和结 构分析的重要工具,但是含有(TFA)的流动相对质谱离 子的产生具有抑制作用,一定程度上降低了液质联用技术 的灵敏性和分析可靠性。
目前常用的方法是降低流动相中 TFA 浓度, 达到降低这种 抑制作用,但是也会造成色谱分析质量的降低;而如果用 甲酸代替 TFA, 会造成色谱分离柱效降低,达不到理想的分 离效果。
本文采用双三元液相色谱系统 (DGLC),充分利用双泵的优 势,将两个泵分别作为流动相的输液泵和柱后溶液的传输 泵,实现与质谱的全自动连接。采用 TFA-Fix 技术或者抑制 器技术降低流动相中 TFA 对 MS 的离子产生的抑制作用, 尤其是柱后抑制器技术大大提高了多肽样品在质谱上的灵 敏度。
具体了解,请点击戴安液相色谱