荧光分光光度计的的结构组成和工作原理
时间:2024-12-20 阅读:104
荧光分光光度计通常由激发光源、单色器、样品池和检测器等部分组成。首先,激发光源发出紫外光或蓝紫光,这些光经过滤光片后照射到样品池中。常用的激发光源包括高压汞灯和氙灯,它们发出的光具有稳定性和高强度,能确保测量的重复性和精确度。
在样品池中,荧光物质吸收激发光后,从基态跃迁到激发态。这些处于激发态的分子是不稳定的,会迅速返回基态,并在这一过程中释放出一部分能量,以光的形式表现出来,即产生荧光。不同物质由于其分子结构的不同,具有各自特别的激发态能级分布,因此它们的荧光激发和发射光谱也各不相同。
荧光物质发出的荧光经过第二个单色器(荧光单色器)的滤过和选择,只有特定波长的荧光能够透过并被检测器接收。单色器的作用在于去除不需要的光,以减少干扰,提高测量的准确性。
检测器通常采用光电倍增管,它具有高灵敏度,能够将接收到的荧光信号转换成电信号,并进行放大。这些电信号随后被记录或显示出来,形成荧光光谱图或数字结果。
需要注意的是,荧光分光光度计所测得的谱图通常为表观光谱,即未经过校正的光谱。在大多数情况下,这种表观光谱并不影响测试结果。但在某些特定情况下,如测量荧光量子产率时,则需要采用经过校正的真实光谱。
综上所述,荧光分光光度计通过激发光源、单色器、样品池和检测器等部件的协同作用,实现了对荧光物质的定量分析和光谱扫描。