测定方法的效能指标

任何一种分析测定方法，根据其使用的对象和要求，都应有相应的效能指标。一般，常用的分析效能评价指标包括：精密度、准确度、检测限、定量限、选择性、线性与范围、重现性、耐用性等;对于生物样品中药物分析方法评价的标准与上述的评价指标相比较，有共同之点也有特殊的要求。测定方法的效能指标可以作为对分析测定方法的评价尺度，也可以作为建立新的测定方法的实验研究依据。下面分别作简要、介绍：

一、精密度

精密度（precision）系指用该法测定同一匀质样品的一组测量值彼此符合的程度。它们越接近就越精密。在药物分析中，常用标准差（S）或相对标准差（RSD）表示：

1.标准（偏）差（standard deviation，SD或S）

2.相对标准（偏）差（rdative standard deviation，RSD），也称变异系数（coefficient of　variation，CV）。

生物样品分析时，常用RSD表示精密度，并可细分为批内（或日内）精密度及批间（或日间）精密度。

批内精密度（within-run precision）：是同一次测定的精密度。通常采用高、中、低三种浓度的同一样品各7～10份，每种浓度的样品按所拟定的分析方法操作，一次开机后，一一测定。计算每种浓度样品的SD值及RSD值。批内精密度也可视为日内精密度（with-in-day precision）。

所得RSD应争取达到5%以内[17-181，但不能超过10%。

批间精密度（between-run precision）：是不同次测定的精密度。通常采用高、中、低三种浓度的同一样品，每种浓度配制7～10份，置冰箱冷冻。自配制样品之日开始，按所拟定的分析方法操作，每天取出一份测定，计算每种浓度样品的SD值及RSD值。批间精密度也可视为日间精密度（day to day precision）。

所得RSD应控制在15%以内。

二、准确度

准确度（Accuracy）是指测得结果与真实值接近的程度，表示分析方法测量的正确性。由于“其实值”无法准确知道，因此，通常采用回收率试验来裴示。生物药物分析中，常用标准添加法来计算回收率，即取已准确测定药物含量P（present）的真实样品（如人血浆样品等），再加入药物标准品已知量A（added），混合物作为测定液，其测定值为M（measured）。测定液要配制成高、中、低三种浓度，每个浓度测定3～5次，求出每种浓度的平均测定值M，且RSD应符合要求。由于预先要准确测定样品中原含有的药物量P，因此也应测定3～5次，求其平均值P，且RSD应符合要求。

按上式计算出的回收率，其结果越接近100%表明分析方法准确度越高。生物样品分析时，一般控制回收率范围应为85%～115%（样品药浓≥200μg/L〉及80%～120%（样品药浓<200μg/L）。

制剂的含量测定时，采用在空白辅料中加入原料药对照品的方法作回收试验及计算RSD，还应作单独辅料的空白测定。每份均应自配制模拟制剂开始，要求至少测定高、中、低三个浓度，每个浓度测定三次，共提供9个数据进行评价。回收率的RSD一般应为2%以内。

三、检测限

检测限（limit of detection, LOD）是指分析方法能够从背景信号中区分出药物时，所需样品中.药物的zui低浓度,无需定量测定.LOD是一种限度检验效能指标，它既反映方法与仪器的灵敏度和噪音的大小，也表明样品经处理后空白（本底）值的高低。要根据采用的方法来确定检测限。当用仪器分析方法时，可用已知浓度的样品与空白试验对照，记录测得的被测药物信号强度S与噪音（或背景信号）强度N，以能达到S/N=2或S/N=3时的样品zui低药浓为LOD;也可通过多次空白试验，求得其背景响应的标准差，将三倍空白标准差（即38空或3S空）作为检测限的估计值口。为使计算得到的LOD值与实际测得的LOD值一致，可应用校正系数（f）来校正，然后依之制备相应检测限浓度的样品，反复测试来确定ωD。如荧光光谱法测定时，检测限=f·38f，根据此式计算出的LOD，再通过制备相应检测限浓度的标准品溶液的测定，以验证实际测得的LOD与上式计算结果相符。如用非仪器分析方法时，即通过已知浓度的样品分析来确定可检出的zui低水平作为检测限。

四、定量限

定量限（limit of quantitation, LOQ）是指在保证具有一定可靠性（一定准确度和精密度）的前提下，分析方法能够测定出的样品中药物的zui低浓度。它反映了分析方法测定低药物浓度样品时具有的可靠性。它与上述的检测限的差别在于定量限要定量测定某一药物在样品介质中的zui低浓度，且定量限规定的zui低浓度应该符合一定的精度。