普通生物显微镜的使用
时间:2010-06-04 阅读:1862
一、显微镜的使用方法
㈠准备工作:首先将显微镜的工作台擦干净,然后将要观察的标本和各种器具准备好。
㈡显微镜的使用
⒈取用:将显微镜从镜箱取出,取出时一手握镜臂,一手托底座将其轻放在离工作台边缘8-10厘米处,偏左的位置。
⒉低倍镜的使用
⑴对光:对光前,先安上合适的目镜(一般采用10×目镜),将10×、40×、100×物镜按照顺时针安在物镜转换器上,逆时针转动转换器使10×物镜对准载物台*的通光孔。从目镜中观察,同时调节反光镜或接通电源,直至视场明亮、均匀为止。
使用双目显微镜对双目镜宽度要进行调节,用推或拉的方法调节两目镜之间的距离,直到在两个目镜上双眼同时观察时,两个图形的视场正好*重合,此时镜筒刻度盘上所示的数字,就是观察者两眼瞳孔之间的距离。
根据物镜的放大倍数调节聚光镜的高度,使用油镜时由于放大倍数大,镜像亮度小,需要较强的照明,需要将聚光镜升至zui高处。
调节可变光阑(光圈)使聚光镜的镜口率与物镜的镜口率一致,才能充分发挥舞静的分辨率,方法为:将显微镜调整到工作状态后,从目镜筒中拔出目镜,一边观察(向拔出目镜的目镜筒里看),一边缩小光阑,这时可看到缩小的光阑被物镜成的像,然后逐渐调大光阑,当光阑像的边缘与物镜通光孔黑圈的边缘一致时停止,这时的聚光镜镜口率与物镜镜口率就一致了。如显微镜可变光阑圆框上刻有表示口径的标尺,可调至物镜镜口率的80%,即物镜镜口率为0.65,则可变光阑的标尺调至0.65×80%=0.52即可。
⑵观察:将标本放置在载物台上,使标本对准通光孔正中,下降镜筒或升高载物台,并从侧面观察,使物镜下端和标本逐渐接近,但不能碰到盖玻片。从目镜观察,用粗准焦螺旋慢慢升起镜筒和下降载物台直到看到标本为至,再调节细准焦螺旋至物像清晰。
⒊高倍镜的观察
在低倍镜下,找到要进一步观察的部位,移至视野中心,再上升聚光镜、逆时针转动物镜转换器换上高倍镜。合格的显微镜操作距离是由低倍镜转换到高倍镜时刚好合用的,一般稍为调节一下细准焦螺旋即可看到清晰的物像。
⒋油镜的观察
在高倍镜下看到标本后,把需要进一步放大的部位移至视野中心。上升镜筒或下降载物台约1.5厘米。将物镜转离光轴,在盖玻片所要观察的部位上滴一滴香柏油,把光阑升至zui大。换上油镜,小心调节粗准焦螺旋,使油镜慢慢下降或慢慢上升载物台,从侧面观察油镜下端与标本之间的距离,当油镜的下端开始触及油滴时即可停止。从目镜观察,调节细准焦螺旋,直至看清标本物像。
观察完毕,上升镜筒或下降载物台,将油镜转离光轴,用干的擦鏡纸轻轻地吸掉油镜和盖玻片上的油,再用浸湿二甲苯的擦鏡纸擦拭两三次,zui后用干净的擦鏡纸再擦拭两三次。
㈢观察后的处理工作
清洁:显微镜上的污物(残物或灰尘),用擦鏡纸擦干净,若擦不干净可蘸少许二甲苯进行擦拭。
显微镜各部分的放置:擦完后,把物镜转离光轴,把反光镜转到与载物台垂直的方向,以减少灰尘粘落上面,而后罩上鏡套,小心的放回鏡箱内,保存备用。
二、使用显微镜时应注意的事项
⒈取放时动作一定要轻,切忌震动和暴力,否则会造成光轴偏斜而影响观察,而且光学玻璃也容易损坏。
⒉由于物镜的螺丝口容易损伤,安装物镜时要特别小心,即先向左方倒转一小段,凹凸双方吻合后再向右方旋转,不要转的太紧,轻轻捻到头,再稍紧即可。
⒊鏡检标本应严格按照操作程序进行,观察时要从低倍镜开始,看清标本后再转用高倍镜、油镜。
⒋使用油镜时一定要在盖玻片上滴油后才能使用。油镜使用完后,应立即将镜头、盖玻片上的油擦干净,否则干后不易擦去,以致损伤镜头和标本。但应注意二甲苯用量不可过多,否则,物镜中的树胶溶解,透镜歪斜甚至脱落,盖玻片移动甚至连同标本一起融掉。
⒌使用时不可用手摸光学玻璃部分,如需擦拭应严格按照光学部件擦拭办法。
⒍使用的盖玻片和载玻片不能过厚或过薄。标准的盖玻片为0.17±0.02毫米,载玻片为1.1±0.04毫米。过厚或过薄将会影响显微镜成像及观察。
三、生物显微镜的擦拭和保养
㈠擦拭
⒈光学部分的擦拭
顺序:吸耳球吹――毛笔、刷子和羽毛轻刷――擦鏡纸轻擦——擦鏡纸蘸二甲苯轻擦。
镜头表面发霉和发雾可用擦鏡纸蘸少量酒精乙醚混合液(3:7)轻擦。内表面发霉和发雾,一般无法清除,所以严防发生。
⒉机械部分的擦拭
用干净的软布擦拭,或用擦鏡纸蘸二甲苯轻擦,不得用酒精和乙醚,因为这些试剂会侵蚀油漆,容易把油漆擦掉。
㈡保养
防潮、防尘、防腐蚀、放热
四、检过程中常出现的问题及其分析解决的途径
问 题 | 原 因 | 解 决 方 法 | |
视野不亮 | 调节反光镜对光源的角度 | | |
灯泡、光源变压器或保险管是否烧坏 | 更换烧坏部件 | ||
视野照明不均匀 | 聚光镜是否在光路*的正确位置 | 低倍镜下,关闭可变光阑,靠调中螺旋把光束调中 | |
物镜是否转到光路中的正确位置 | 转入正确位置 | ||
透镜上有无指纹或油渍 | 擦鏡纸蘸二甲苯擦拭所有外露透镜 | ||
所有物镜均难以调焦 | 目镜表面生霉 | 更换目镜 | |
细准焦螺旋是否调限 | 改变起位置至可调范围中间 | ||
是否标本太厚,厚薄不均 | 换较薄均匀清晰的标本 | ||
标本正面朝下 | | ||
高倍镜和油镜难于调焦 | 盖玻片厚度是否正确 | 换标准盖玻片 | |
聚光器是否处于正确位置和正确聚焦 | 调节聚光镜位置和聚焦 | ||
利用合适的油镜浸没油镜检查 | | ||
高倍镜和油镜下难于找到标本 | 用低倍镜准确地把标本移到视野的*,然后用高倍镜或油镜把标本调中 | | |
视野中所见到的图象有污物、霉斑或人工假象 | 当转动目镜时鏡内霉斑或污物是否随之转动 | 是 | 清洁目镜 |
否 | 清洁物镜 | ||
检查载玻片和盖玻片之间是否有气泡 | 移去盖玻片重新封片 | ||
是否看到清晰黑色界限的环状物 | 存在小气泡 |