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耗材专区 | 应用S-X3不锈钢凝胶净化柱检测水产品中的雌激素

时间:2024-12-20      阅读:91

前言


雌性激素(Estrogen),又称女性激素,是一类主要的女性荷尔蒙。分为两大类(均为类固醇激素),即雌激素和孕激素。雌性激素是雌性脊椎动物的性激素,具有促进第二性征出现的作用。过高的雌性激素会对男性的生殖系统产生明显影响,包括影响雄性激素的水平,导致内分泌紊乱,同样过高的雌激素会增大女性生病的概率,也会对青春期的孩子发育造成影响,故找到一种快捷高效的检测方法尤为重要。

本实验参考《GB 31660.2-2019 食品安全国家标准 水产品中辛基酚、壬基酚、双酚A、已烯雌酚、雌酮、17α-乙炔雌二醇、17β-雌二醇、雌三醇残留量的测定 气相色谱-质谱法》,利用GPC1000全自动凝胶净化系统对样品提取液进行净化,GC-MS进行检测,方法简单、快捷,能够很好地去除干扰物对目标物的影响。



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实验过程



1.1 仪器与试剂
GPC1000全自动凝胶净化系统(北京莱伯泰科仪器股份有限公司);
MVP 全自动高通量真空平行浓缩仪,北京莱伯泰科仪器股份有限公司;
气质联用仪:7890B-5977B,安捷伦科技(中国)有限公司;
S-X3不锈钢凝胶净化柱(20*300mm,货号:Y020207015,北京莱伯帕兹检测科技有限公司;
E.T.氮吹浓缩仪,货号:C020017,北京莱伯帕兹检测科技有限公司;
冷冻离心机,GL-20G-Ⅱ,上海安亭科学仪器厂;
甲醇、环己烷、乙酸乙酯(色谱纯),购自赛默飞世尔科技(中国)有限公司;
碳酸钠(分析纯),购自国药集团化学试剂有限公司。

1.2 工作液配制
混合标准工作溶液:分别精密量取标准储备液适量于10mL容量瓶中,甲醇定容,配成浓度为双酚A50μg/L,已烯雌酚100μg/L,雌酮、17α-乙炔雌二醇、17β-雌二醇、雌三醇200μg/L的混合标准工作液。
取混合标准工作溶液50μL、100μL、200μL、500μL、1000μL于1.5mL样品瓶中,40℃氮吹至干,按1.3.3方法衍生,制成双酚A浓度均为2.5μg/L、5μg/L、10μg/L、25μg/L、50μg/L的梯度系列,已烯雌酚浓度均为5μg/L、10μg/L、20μg/L、50μg/L、100μg/L的梯度系列,雌酮17a-乙炔雌二醇、17β-雌二醇、雌三醇浓度均为10μg/L、20μg/L、40μg/L、100μg/L、200μg/L的梯度系列标准曲线。

1.3 实验部分
1.3.1 样品制备
将水产品样品均质,称取5.0g样品,加入3mL100g/L的碳酸钠溶液,加入20mL乙酸乙酯,超声15min,5000r/min离心4min,取上清液,加入10mL乙酸乙酯复提,合并上清液后,40℃旋蒸至近干,加入8mL50%环己烷乙酸乙酯溶液复溶,混匀,待凝胶净化处理;同时做样品空白。
1.3.2 凝胶净化处理
按照下图所示的方法进行GPC1000方法编辑,并加载方法到相应通道,进行样品的凝胶净化。收集洗脱液,40℃氮气吹干,待衍生。
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1.3.1 衍生化
在1.3.2中的浓缩瓶中加入200μL丙酮,加入30μL七氟丁酸酐,用锡箔纸封口,在35℃水浴中衍生1h,用正己烷定容至1.0mL待测。
1.3.1 GC-MS检测条件
色谱柱:HP-5MS 30m*0.25mm* 0.25μm;
进样口温度:250℃,流速:1mL/min;
不分流进样,1min后分流60mL/min;
进样量:1μL;
柱箱:120℃,保持2min,以15℃/min升至250℃,以5℃/min升至 300℃,保持5min;
溶剂延迟:8.5min;
离子源温度:230℃;
四极杆温度:150℃;
传输线温度:280℃。


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实验结果



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表1 水产品中雌激素的回收率

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图1 标准样品色谱图

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图2 空白样品色谱图

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图3 加标样品色谱图

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实验结论



本次实验展示了一种使用S-X3不锈钢凝胶净化柱(20*300mm,货号:Y020207015,对水产品中的雌激素测定的净化,回收率在70.5%~110.5%之间,重现性RSD为3.9-8.1%,回收率高、重现性良好,说明S-X3不锈钢凝胶净化柱,适用于水产品中的雌激素测定的净化,并且结果稳定、可靠

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参考文献



[1] GB 31660.2-2019 食品安全国家标准 水产品中辛基酚、壬基酚、双酚A、已烯雌酚、雌酮、17α-乙炔雌二醇、17β-雌二醇、雌三醇残留量的测定 气相色谱-质谱法。



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