液相色谱仪的维护保养及气泡问题的处理
时间：2014-02-21 阅读：3725
1.HPLC的日常操作条件：
温度：10—30℃;
相对湿度<80%;
是恒温、恒湿，远离高电干扰、高振动设备。
2.泵的保养：
1)使用流动相尽量要清洁;
2)进液处的沙芯过滤头要经常清洗;
3)流动相交换时要防止沉淀;
4)避免泵内堵塞或有气泡;
3.进样器的保养：
1)每次分析结束后，要反复冲洗进样口，防止样品的交叉污染;
4.柱的保养：
1)柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动;
2)当柱子和色谱仪联结时，阀件或管路一定要清洗干净;
3)要注意流动相的脱气;
4)避免使用高粘度的溶剂作为流动相;
5)进样样品要提纯;
6)严格控制进样量;
7)每天分析工作结束后，要清洗进样阀中残留的样品;
8)每天分析测定结束后，都要用适当的溶剂来清洗柱;
9)若分析柱长期不使用，应用适当有机溶剂保存并封闭;
5.检测器(UV)的保养：
1)紫外灯的保养：在分析前、柱平衡得差不多时，打开检测器;在分析完成后，马上关闭检测器。
2)样品池要保养。
液相色谱仪在使用中整个液路系统有两个地方易产生气泡：
1、泵头吸液白管。
2、检测口流通池。
气泡产生的原因：温度上升，压力下降!
温度上升或柱温上升，当接近试剂沸点时，试剂汽化产生气泡，试剂中已含微小气泡，因加热变大而产生气泡。
压力下降产生气泡，流动相中一直包含微小气泡，无论超声过滤，均不能池底去掉它，那么当压力下降时，微小气泡将长大，且多个小气泡易聚集成大气泡，而影响正常实验。
下面分部位说明气泡产生原因及解决办法:
一、泵头及吸液白管。
1、泵头：泵头是压力变化zui剧烈的地方，也是zui易产生气泡的地方，泵头靠负压而吸液，而负压必然使流动相中的小气泡长大，当泵腔变正压时，已长大的气泡未必能全部变小流入后续液路，则泵腔内将积存气泡，从而影响吸液精度，鉴于此，泵头上专门设计了排气阀，便于泵头排气，观察柱压稳定了说明泵头排气成功。
2、吸液白管长气泡。
a、吸液白管接触空气部位漏气，产生可见气泡，吸液白管是常压和负压交臂变化部位，其漏表现为大气进入白管内，而不易见到管内液体漏出。
处理方法：更换白管。
b、滤头堵：滤头堵使得液体流入滤头的速度下降，泵强制吸液而产生真空气泡。
判断：拔掉滤头不再长气泡则是滤头堵。
处理：A、30%硝酸水液超洗滤头，20分钟左右。
B、水超洗滤头，注意换水多超几次。
c、流动相汽化产生气泡。
尤其是夏天室温高，沸点低的试剂易汽化，比如：乙酸，**，氨水，石油醚等易于汽化。
处理：超声，降室温。
二、检测流通池长气泡。
流通池是易积存气泡的地方，其对基线影响巨大，流动相流入色谱柱后，压力越来越小，微小气泡将逐渐长大，而流通池截面积远大于钢管面积，则气泡在池内易长大，气泡的特点是长大在无外压的情况下，很难缩小到钢管内经以下流出流通池，所以它就存在了池内。
处理方法：1、对于示差检测器(示差检测器池只能耐几个公斤压力)，只能是反复冲洗斥资，举高废液瓶靠废液管内液柱给池加一个微小反压，所以这就靠成了示差池子排气困难些，但无它法。
三、我公司紫外检测器池内气泡排除，当基线很乱，无规则时，应考虑池子排气泡。
1、反复调节反压器压力，直至基线稳定。
2、手工排气泡步骤。
a、取下反压器，接上备用钢管。
b、泵吸液，检测器调零。
c、在现柱压基础上加一个50KG压力上限保护，比如，现柱压60KG，pmax设压力上限110KG即可。(我公司紫外池子可耐150KG压力加50KG保护可保证池子不会损坏)。
d、手堵废液钢管出液端，眼看泵柱压上升，且同时看检测器显示屏上AV值的变化。
如果池内有气泡，则手堵废液管，AN值将剧烈变化，当手松开后AV值再次大步上升，证明池内有气泡但没有排掉，当手堵和松开废液管时，AV值基本不变时，证明排汽泡成功，再观察基线将稳定。
四、池内有气泡，手堵废液管，AV值剧烈变负的原因解释，池内充满空气或液体时，光透过率