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慢性阻塞性肺病(COPD)小鼠模型的建模方法

时间:2022-10-28      阅读:847

实验周期:4-6 weeks

建模方法:

主要试剂: 红金龙香烟(湖北中烟工业有限责任公司生产,烤烟型,每支含焦油量9mg、烟气烟碱量0.7mg、烟气一氧化碳量12mg),脂多糖(lipopolysaccharide,LPS,美国Sigma公司),TNF-alpha和IL-18 ELISA试剂盒cloud-clone公司)。
建模方式:SPF小鼠,适应性饲养1周,采用鼻腔滴入LPS加熏香烟的方法建立COPD小鼠动物模型分别于第1、29经鼻腔滴入LPS(30μg/6μL),第2-30天(除第29天)采取熏香烟法,将小鼠放入自制的玻璃熏箱,10支/次,30min/次,5d/周,共4周。

模型评价
一般观察:一般情况空白对照组小鼠无死亡,毛发光泽,呼吸均匀,活动正常;模型对照组小鼠毛发无光泽,部分有脱毛现象,躁动,熏烟时喜扎堆,倦怠蜷缩,汗出,腹部胀大,呼吸急促,出现点头运动,甚者张口呼吸明显。

小鼠肺功能检测看小鼠气道阻力、动态肺顺应性、最大呼气流量、吸气时间、呼气时间、

组织病理学
肺组织形态学检测:
腹腔麻醉小鼠后,开胸暴露胸腔:取左侧肺叶固定于10%甲醛溶液24h,常规脱水石蜡包埋,切片行HE染色,光镜下观察。
空白对照组小鼠肺泡结构清晰,肺泡大小均匀,气道黏膜上皮结构完整,纤毛排列整齐;模型对照组小鼠部分肺泡壁塌陷,肺泡不规则扩大并相互融合,形成肺大泡,肺间质内可见不同程度的炎性细胞浸润,支气管黏膜上皮脱落,黏膜皱襞增多,突入管腔,纤毛黏缩,管腔变窄,符合COPD病理改变。

标志因子水平
TNF alpha、Il-18检测:
最后一次烟熏完后24小时内处死,按0.05mL/10g)腹腔麻醉小鼠,将小鼠腹主动脉取血法取血1mL,室温下放置2h后,2 000r/min离心20min,取血清,-20℃保存备用。按ELISA试剂盒操作步骤说明检测小鼠血清中TNFalpha、


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