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液相色谱柱正确使用方法

北京国谱科技有限公司

2016/8/30 12:01:38

液相色谱柱正确使用方法

一、样品方面

  1.除去微粒及杂质

  2.了解样品在流动相中的溶解度

  如溶样品的溶剂不是流动相,一定要用流动相试溶解度,防止其在流动相中析出

  3.了解样品与色谱柱的基质/填料是否有相互作用

  二、流动相方面

  1.除去微粒

  纯度的要求:超纯水,梯度实验时水中有机杂质含量要低;缓冲液的PH值,在填料的允许范围内;缓冲液()的浓度;有机溶剂:色谱纯,杂质含量尽量低,并与填料相匹配

  2.流动相对样品的溶解度

  有机溶剂或水的比例

  三、色谱柱的清洗

  对所做的样品要有充分的了解,用对该样品洗脱能力zui强的流动相清洗

  硅胶柱的一般方法是先用甲醇洗去极性杂质,然后用干燥的二氯甲烷、正庚烷100~200ml依次活化

  键合相柱(烷基)的一般方法是用20倍体积的甲醇-*仿-甲醇-水依次冲洗

  (记住:每种色谱柱可能性有特定的方法,一定要先看其使用说明!)

  四、色谱柱的存放

  存放前的处理要除去杂质、缓冲盐

  合适的存放溶剂

  避免色谱柱床的干涸

  避免机械震动

  防止细菌生长

  注意存放的温度

 

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