对硝基酚是我国68 种优先控制污染物之一，也是种重点控制的污染物之一。广泛的应用于农药、制药工业、杀虫剂以及染料行业，具有致癌、致畸、致突变的潜在毒性。
目前硝基酚类的测定方法有气相色谱法、液相色谱法、紫外分光光度法、荧光光谱法和毛细管电泳法等。气相色谱法在定量分析时，常需要用已知物纯样品对检测后输出的信号进行校正，分光光度法准确度不高，以上方法都普遍存在灵敏度不足的明显缺憾。液相色谱与串联质谱的联用则能避免这一问题。
方法优势：
迪马科技开发的《尿液中对硝基酚的检测》，采用固相萃取-超液相色谱串联质谱法测定人尿中的对硝基酚，以浓盐酸作为提取液，采用ProElut PXL 固相萃取柱净化样品，通过UPLC-MS/MS检测；方法定量限是5 μg/kg。本方案前处理步骤简单、净化效果好，基质效应小且检测时间短；准确度高，重现性好。
柱优势：
ProElut PXL 柱填料由多种吸附剂按照一定的比例分层填装而成，采用多种作用机理去除尿液中尿酸、尿素等杂质，适用于尿液中对硝基酚的检测。本产品是商品化的成品柱，吸附剂稳定性好，不受外界环境因素影响，保证实验结果的重现性和准确性；过柱过程中操作步骤简单，有机溶剂用量少，减少对人体的危害同时提高工作效率。
以下为详细解决方案，敬请参考！
尿液中对硝基酚的检测——UPLC-MS/MS法
1、适用范围
本方案适用于尿液中对硝基酚的检测，本方法定量限是5 μg/kg。
2、提取
取10 g样品，加入2 mL浓盐酸，沸水浴60 min，冷却至室温，待净化。
3、净化——ProElut PXL 3 mL（Cat#：65920）
a活 化： | 加入5 mL甲醇、5 mL水，流出液弃去； |
b上 样： | 将待净化液加入小柱，流出液弃去； |
c淋 洗： | 加入3 mL 30%甲醇水淋洗小柱，流出液弃去； |
d洗 脱： | 加入3 mL 80%甲醇水，收集洗脱液，并用水定容至10 mL，过微孔滤膜供LC-MS分析。 |
4、分析条件
4.1 UPLC条件
色谱柱：Leapsil C18，100 x 2.1mm，2.7 μm（Cat#：86005）
流 速：0.3 mL/min
进样量：5 μL
柱 温：35 ℃
流动相：10 mmol/L乙酸铵：乙腈=8：2
4.2 质谱条件
电离模式：ESI 扫描方式： 负离子扫描
描检测方式：多反应监测 电喷雾电压：-4500 V
雾化气压力：50 psi 辅助气压力：50 psi
气帘气压力：20 psi 离子源温度：500 ℃
定性离子对、定量离子对、碰撞气能量及去簇电压见下表
化合物名称 | 定性离子对 (m/z) (母离子/子离子) | 定量离子对 (m/z) (母离子/子离子) | 碰撞气能量/ev | 去簇电压/V |
对硝基酚 | 138.0/107.8 | 138.0/107.8 | -24.7 | -63 |
138.0/92.2 | -30.0 | -63 |
5、添加回收结果
人尿中对硝基酚的HPLC检测添加回收结果
分析物 | 添加水平(μg/kg) | 回收率(%) |
对硝基酚 | 5 | 100.96 |
20 | 102.48 | |
100 | 99.37 |
对硝基酚10.0 μg/L MRM色谱图
对硝基酚标准10.0 μg/L XIC色谱图
尿液中对硝基酚的检测——UPLC-MS/MS法相关产品信息：
货号 | 名称 | 规格 |
样品前处理 | ||
65920 | ProElut PXL | 3 mL，50/pk |
244358 | 12管防交叉污染真空SPE萃取装置 | 12位 |
4803 | 1,3,6mL柱管通用连接器 | 15/pk |
4806 | 考克(控制流量) | 15/pk |
99011 | 真空/正压两用泵，无油 | 1/pk |
99013 | 抽滤瓶套装 (包括硅橡胶管2米,2L抽滤瓶及橡胶塞) | 1/pk |
30039 | FitMax针头式过滤器 Nylon | 13 mm,0.22 μm 100/pk |
30040 | FitMax针头式过滤器 Nylon | 13 mm,0.45 μm 100/pk |
标准品 | ||
12-N-10855-5G | 对硝基酚[100-02-7] | 5 g |
色谱柱及保护柱 | ||
86005 | Leapsil C18 UHPLC/HPLC兼容反相色谱柱 | 100 x 2.1mm，2.7 μm |
HPLC溶剂?缓冲盐?离子对试剂 | ||
50102 | 甲醇 HPLC级 | 4 L |
50101 | 乙腈 HPLC级 | 4 L |
50138 | 乙酸铵 HPLC级 | 100 g |
通用色谱产品 | ||
52401B | 瓶架/蓝色（现货） | 50孔 |
52401A | 瓶架/白色（现货） | 50孔 |
1034 | 样品瓶（棕色/螺纹） | 2 mL, 100/pk |
1035 | 样品瓶盖/含垫（已经组装） | 100/pk |
H80465 | HPLC 进样针 | 25 μL |
红色产品货号#30039、#30040、#1034、#1035*
