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蛋白质测试盒(QCPR-500)

北京绿源伯德生物科技有限公司

2016/10/29 8:54:40

产品说明

蛋白质被称为生命的物质基础,它是生命科学领域zui重要的大分子之一。蛋白质由多肽氨基酸组成,它在生物体内发挥着各种关键的作用。蛋白质定量检测是生命科学家常用的方法。简单、直接、自动化的蛋白质浓度检测方法是zui为理想的。本公司生产的蛋白质测试法是基于改进的考马斯蓝G的方法。显色剂与蛋白质经过复杂反应形成蓝色,其颜色强度(595nm)与样品中的蛋白质浓度成正比。优化配方大幅减少了原样品中物质的干扰以及对多肽的更为敏感。  

 

产品用途

直接检测样品蛋白质的总含量。

 

产品特点

灵敏、准确:用10 mL样品。测试范围 0.06 – 1.0 mg/mL 蛋白质。

 

简单、高通量 测试过程仅需添加工作试剂及读取吸光度。易于自动化高通量测试,每天可检测几千份样品。

 

低干扰:葡萄糖、维生素、氨基酸、DNA RNA、盐、 EDTA (< 12 mM)  苯酚 (< 50 mM)  尿素 (< 0.6 M) 、表面活性剂 (< 0.1%) SDS (< 0.1% SDS) 均不影响测试。

 

多功能性: 测试可用96孔板或比色皿进行。

 

试剂盒组成(96孔板供500份测试)

试剂: 20 mL 5 x 浓缩试剂    标准品: 1 mL 1.0 mg/mL BSA

   

储藏条件:室温运输 。试剂和标准品分别在室温和 -20°C 下保存。

 

预防措施:本产品仅供研究用。使用过程中应严格遵循实验安全措施。

 

试剂准备:

按如下比例配制足量的工作试剂。按1:5比例将 5x 试剂蒸馏水稀释,现配现用。使用前放置至室温。

 

96孔板测试步骤: 

1. 按照下表比例稀释标准品。取透明平底96孔板,将10 mL 稀释的标准品和稀释的样品放入不同孔中。将稀释的标准品在 -20°C 保存备用。

No

标准品 +  H2O

Vol (mL)

BSA (mg/mL)

BSA (mg/10 mL)

1

100mL +     0mL

100

1.0

10

2

  80mL +   20mL

100

0.8

  8

3

  60mL +   40mL

100

0.6

  6

4

  40mL +   60mL

100

0.4

  4

5

  30mL +   70mL

100

0.3

  3

6

  20mL +   80mL

100

0.2

  2

7

  10mL +   90mL

100

0.1

  1

8

    0mL + 100mL

100

0

  0

 

2. 加入 200 mL 工作试剂,轻敲孔板使其混合。

3. 在595nm570-630nm)处读取吸光度。

 

比色皿测试步骤:

1. 照上述办法制备标准品。将20 mL 稀释的标准品和20 mL 稀释的样品 加入比色皿

2. 加入 1000 mL工作试剂并轻敲使其混合 。

3. 在595nm570-630nm)处读取吸光度。

 

 

浓度计算

从标准品的测值中减去空白对照(水, 8号)的测值,绘制DOD与标准浓度的曲线标准曲线确定样品的蛋白质浓度。

 

实验必需品(未提供)

吸液用仪器及配件。透明平底96孔板,吸光度分析仪; 比色皿和分光光度计。

 

备注

如果蛋白质浓度 > 1 mg/mL, 用蒸馏水稀释样品, 以标准曲线范围内的吸光度值计算样品的蛋白质浓度。试剂和样品混合后尽快读出吸光度的值。

 

高灵敏度测试将50 mL 样品 加入 200 mL 工作试剂可提高测试的灵敏度 (测试范围 3 – 200 mg/mL).  

  

         标准曲线(96孔板)

上图: 标准测试 下图: 50 mL 样品 加 200 mL 试剂

 

 

论文发表

1. Sharifuzzaman, S.M. and  Austin, B. (2009). Kocuria SM1 controls vibriosis in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss, Walbaum). J Appl Microbiol. 108(6): 2162 – 2170.

 

2. Stefanidis A., et al. (2009). The role of thermogenesis in antipsychotic drug-induced weight gain. Obesity (Silver Spring). 17(1):16-24.

 

3. Verty, A.N. et al. (2009). The effects of rimonabant on brown adipose tissue in rat: implications for energy expenditure. Obesity (Silver Spring). 17(2):254-61.

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