技术文章

一、苏丹heiB染色试剂盒简介
脂质(Lipid)是中性脂肪、类脂及其衍生物的总称，其共同的物理特性是不溶于水，易溶于有机溶剂(例如乙醇yimi等)。人体的脂肪主要有两种：1、储存脂肪，如中性脂肪，主要分布于皮下、肾、胰腺等部位。2、结构脂肪，如类脂(磷脂、糖脂、胆固醇等)，主要分布于细胞内。中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油组成的脂类，呈中性。中性脂肪是储存能量的方式之一，在氧化时释放出能量。

在正常情况下，除了脂肪细胞外，其他细胞在光学显微镜下几乎看不到脂滴，如果细胞质内出现大量脂滴，即为脂肪变性。脂肪变性常见于肝细胞、心肌细胞、肾曲管上皮细胞等。
中性脂肪染色经常采用苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ、苏丹heiB、油红O法等。传统方法中，常采用苏丹染料，其染色原理一般认为是物理上的溶液作用或吸附作用，借溶液作用使脂肪染色。染料在冰冻切片内脂质的溶解度较在原溶剂中的溶解度更大，所以在染色时染料就从有机溶剂转移入脂质，使脂质呈现出染液的颜色。

苏丹heiB染色试剂盒染色时，标本不宜采用含有乙醇的固定液(如需要固定可采用10%的福尔马林)、也不宜采用石蜡切片，需用冰冻切片或碳蜡切片。主要用于显示组织器官的脂肪变性和类脂质的异常沉着，常发生于肝、肾、心等实质脏器的脂肪变性，细胞内出现多数中性脂肪滴；鉴别和诊断脂肪组织中所发生的肿瘤及其性质。其中，脂肪瘤、脂肪肉瘤、卵泡膜瘤、肾上腺皮质腺瘤等行苏丹heiB染色后，呈阳性反应；肾透明细胞癌、卵巢纤维瘤等行苏丹heiB染色后，呈阴性反应。

二、苏丹heiB染色试剂盒组成
试剂(A): Sudan black B stain 50ml 100ml RT 避光
试剂(B): Nuclear fast red stain 50ml
100ml RT 避光
使用说明书 1份

三、自备材料
1、载玻片
2、70%的乙醇
3、蒸馏水
4、显微镜
5、甘油明胶封固液

四、苏丹heiB染色试剂盒操作步骤（仅供参考）
1、 新鲜组织低温切片，一般-20℃～-25℃，如果样本为脂肪瘤，应调节到-30℃。
2、 冰冻切片5～10μm，以6～8μm为佳，贴于载玻片上。
3、 70%的乙醇稍微浸洗一下。
4、 入Sudan black B stain中，浸染15～20min。
5、 70%的乙醇洗去多余染色液。 6、 蒸馏水浸洗1min。
7、 Nuclear fast red stain淡染细胞核5～10min。
8、 自来水稍洗后，蒸馏水稍洗一下。
9、 用滤纸吸去切片及周围的水分，让其稍微干燥。
10、 甘油明胶或阿拉伯糖胶封固。

五、苏丹heiB染色试剂盒染色结果
中性脂肪 hei色
磷脂 灰hei色
细胞核 红色

六、苏丹heiB染色试剂盒注意事项
1、 脂肪染色，标本不宜采用含有乙醇的固定液、也不宜采用石蜡切片，需用冰冻切片。 2、 在染色过程中必须防止染料发生沉淀。故切片放入染液时，应密封，勿与流动空气相接
触，避免溶液挥发时发生沉淀。 3、 冰冻切片较易着色，复染时应避免过染。 4、 苏丹染料容易褪色，应密闭保存。
5、 甘油明胶封固的样本，保存时间不长。如需长期保存，可以在盖玻片与载玻片交界的边
缘用中性树胶封闭。
6、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
七、苏丹heiB染色试剂盒储存条件：6个月有效

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