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简单介绍细胞冻存的方法

绘辛生物科技(上海)有限公司

2017/1/16 11:02:45
细胞冻存的方法:
       
1.细胞:选对数生长期细胞,收集细胞24小时前换液一次。
 
  2.计数:按常规方法把细胞制成细胞悬液,计数,令细胞密度达5×106/ml,离心去上清,吸入离心管中。
 
  3.冻存液:先用培养液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO冻存液,按上法一滴滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。
 
  4.分装:分装入无菌安剖中,每安剖加1.5毫升细胞悬液。
 
  5.封口:用塑料安剖时拧紧瓶口即可;如用火焰封闭安剖口后,仔细检查,定要封严,必要时可浸入蓝色液中观察,为安全起见,把安剖缝入纱布小袋中,以防液氮浸入后,融解时因受热发生爆炸伤人;纱袋一端系以线绳,末端扎有小牌,注明:细胞名称,冻存日期,以便日后查找。

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