上海蜜骏生物科技有限公司
2017/2/14 9:33:40前期准备工作：
实验前样本和试剂盒室温平行1小时，，如果样本是冻存样本，，应提前拿到2-8摄氏度进行解冻（不建议直接室温解冻）
准备好实验所需耗材，蒸馏水（去离子水）。
操作流程描叙：
1，将要进行实验的板孔进行设定好，阴性对照和阳性对照，每个点设定平行，需要用到4
个孔，空白只需1个孔。剩下孔可以做为样本孔
2，加样：阴性对照和阳性对照每个设定2个孔（做平行），每孔加入50微升，加样过程中
注意换枪头，样本孔中每孔加入50微升，加样过程中注意换枪头，空白孔加入50微升
蒸馏水。特别要说明的是，标准加样和样本加样尽量控制在15分钟内加完，如果时间
拖的太长，会导致前面孔先反应后面孔才开始反应，这样数值偏差过大。加完样后盖上
封板膜，至37摄氏度孵育30分钟.
3，洗版，在孵育过程中可以将洗涤液配好，20ml30倍浓缩洗涤液用蒸馏水或者去离子水定
容到600ml即可。每孔加入250-300微升的洗涤液（不要漫过版孔），（如果有震荡仪的
话，可以讲板子放入震荡仪上5秒左右，然后静止三十秒，没有请忽略次过程）将板子
在桌子上晃动5秒左右，然后静置30秒，甩干，拍板。说明：甩干过程尽量要快，1
秒内就可以完成，不要慢慢倾斜倒掉液体，直接翻板甩掉液体即可。拍板过程需要在桌
子上垫一层吸水纸或者滤纸，版孔朝下拍几下，拍干区别主要看吸水纸和滤纸上没有明
显的水渍为完成。
4，每孔加入50微升的酶标试剂，此处在空白孔中不需要加（空白孔为空），孵育30分钟。
5，洗版同步骤4
6，显色，先每孔中加入50微升的显色A液，然后每孔中加入50微升显色B液。避光37
摄氏度显色15分钟
7，终止，每孔加入50微升的终止液，注意，加完终止液必须在15分钟内读数，超过时间
读数无效。在规定时间内读数都是有效的。
至此，整个实验结束
需要额外提醒的是：在做完整个实验过仪器之前，仪器预热半小时，这个计算好时间，
也可以直接将仪器一直开着，直到整个实验结束。
在加液过程中不要使枪头触及到板子底部，一般枪头都悬空，可以将枪头靠在孔边缘，但枪
头尖悬空，如果枪头上残留液体看整体多少量，不要吹打下去。特别忌讳在版孔内壁流向版
孔。整个加液过程不要产生气泡。（洗涤液除外）
