上海信裕生物科技有限公司
2017/3/6 16:21:15ELISA试剂盒中几大关键影响非特异性显色的
影响ELISA试剂盒中非特异性显色的原因许多,如试剂盒特异性、查验标本中含酶符号物的干扰物,操作进程中的疑问。这篇文章就这一原因作一简明剖析,以便可以经过以上方法把非特异显色降至zui低极限,然后跋涉检查的特异性,并得到更、牢靠的试验效果。
ELISA试剂盒内源性干扰物:类风湿因子(RF)、黄疸等,类风湿因子是可效果于多种动物以及人IgGFc段的本身抗体,大都为IgM类,能充当抗原成分与固相及酶标抗体反应,然后呈现非特异性显色。
黄疸血标本中常富含内源性过氧化物酶,如用辣根过氧化物酶为符号物,就有可以发生非特异性显色。
ELISA试剂盒外源性干扰物,常常因样品搜集、贮存、处置不当构成如样品溶血,被细菌污染,标本凝集不全等。溶血标本,红细胞溶解分裂,释放出血红素构成,而血红素中的铁卟啉是过氧化物酶的类似物,以HRP为符号的ELISA测定中,溶血标本可以会增加非特异性显色。如有细菌污染,菌体中可以富含内源性HRP,有国内报导酶免HAg试剂检查溶血标本时可构成假阳性。如在冰箱中保管过久,其间的IgG可发生聚合,在直接法ELISA试剂盒中可使本底加深。因而,血标本在搜集处置时应留神,在冰箱中保管不易过久。