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UMUC3细胞株复苏失败原因分析

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2017/3/23 18:47:15

UMUC3细胞株复苏失败原因分析

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产品名称:UMUC3细胞

中文名称:人膀胱癌细胞

种属:人

来源:膀胱癌;男性

培养条件:1640

生长状态:贴壁

UMUC3细胞株复苏失败原因分析

其他细胞培养用液

在细胞培养过程中,除了培养基外,还经常用到一些平衡盐溶液、消化液、pH调整液等。

一、平衡盐溶液(balanced  salt  solution,BSS):主要是由无机盐、葡萄糖组成,它的作用是维持细胞渗透压平衡,保持pH稳定及提供简单的营养。主要用于取材时组织块的漂洗、细胞的漂洗、配制其他试剂等。zui简单的BSSRingerD-Hank'sHank's的一个主要区别是前者不含有Ca2+Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。Earle平衡液含有较高的NaHCO3(2.2g/L),适合于5%CO2  的培养条件,Hank's平衡液仅含有0.35g/L  NaHCO3,不能用于5%CO2的环境,若放入CO2培养相,溶液将迅速变酸,使用时应注意。

配制溶液应使用双蒸水或去离子水。如果配方中含有Ca2+Mg2+,应当首先溶解这些成分。配好的平衡盐溶液可以过滤除菌或高温灭菌。

 

UMUC3细胞株复苏失败原因分析

EVSA-T                                           人乳腺癌细胞              乳腺癌;腹水转移;女性     DMEM     贴壁

BT-483                                           人乳腺导管癌细胞              乳腺导管癌;女性         DMEM     贴壁

MDA-MB-435                              人乳腺癌细胞              乳腺癌     DMEM     贴壁

MDA-MB-157                              人乳腺癌细胞              乳腺癌;胸腔积液转移;女性     L15   贴壁

SW1417                                         人结肠癌细胞              结肠癌;女性         L15   贴壁

MH-S                                              小鼠肺泡巨噬细胞         小鼠         巨噬细胞;雄性;SV40转化;BALB/cJ       1640         悬浮

L2                                                    大鼠肺泡上皮细胞         大鼠         肺泡;上皮细胞     DMEM     贴壁

KBM7                                             人慢性髓白血病细胞细胞          慢性髓原白血病;男性         IMDM      悬浮

SUM149PT                                   人乳腺癌细胞              乳腺癌;女性         DMEM     贴壁

FL83B                                             小鼠正常肝细胞     小鼠         肝;自发永生;C57BL/6J      DMEM     贴壁

PL45                                               人胰腺导管癌细胞              胰腺导管癌;男性         DMEM     贴壁

MPC5                                             小鼠肾足细胞         小鼠         肾足细胞;SV40转化    DMEM     贴壁

HUVSMC                                       人脐静脉平滑肌细胞          脐静脉平滑肌         DMEM     贴壁

Htori-3                                           人正常甲状腺细胞              甲状腺;SV40转化;女性    F12K          贴壁

TPC1                                              人甲状腺癌细胞          甲状腺乳头状癌;女性         L15   贴壁

C28/I2                                            人正常软骨细胞          软骨;SV40转化;女性        DMEM     贴壁

hADSCs                                         人脂肪间充质干细胞          脂肪间充质干细胞         DMEM     贴壁

M059K                                           人胶质瘤细胞              胶质瘤;男性         EMEM      贴壁

C1498                                            小鼠白血病细胞     小鼠         白血病;雌性;C57BL/6J      DMEM     悬浮

SNU878                                         人肝癌细胞          肝癌;女性     1640         贴壁

SNU886                                         人肝癌细胞          肝癌;男性     1640         贴壁

NCI-H1417                                   人小细胞肺癌细胞              小细胞肺癌;女性         1640         贴壁

HNSC                                             人神经干细胞              神经干细胞     DMEM     贴壁

2BS                                                 人胚肺成纤维细胞              胚肺;成纤维细胞;女性     DMEM     贴壁

HIBEpiC                                         人肝内胆管上皮细胞          肝内胆管;上皮细胞     1640         贴壁

hUC-MSC                                      人脐带间充质干细胞          脐带;间充质干细胞     DMEM     贴壁

MBT-2                                            小鼠膀胱癌细胞     小鼠         膀胱移行细胞癌;C3H/He    1640         贴壁

32DClone3                                   小鼠骨髓淋巴母细胞     小鼠         骨髓淋巴瘤;C3H/HeJ  DMEM     贴壁

A-72                                               犬癌细胞              癌细胞;金毛猎犬         1640         贴壁

MIHA                                             正常人肝细胞                   1640         贴壁

IR983F                                           大鼠骨髓瘤细胞     大鼠         骨髓瘤     IMDM      悬浮

SF9                                                  昆虫卵巢细胞         昆虫         卵巢;自发永生;雌性         Grace's Ins       悬浮+贴壁

Ishikawa                                       人子宫内膜癌细胞              内膜腺癌;女性     1640         贴壁

HCEC                                             人角膜上皮细胞          角膜;上皮细胞     1640         贴壁

HCC1500                                      人乳腺管癌细胞          乳腺管癌;女性     DMEM     贴壁

Th17                                               小鼠辅助性T细胞          小鼠         辅助性T细胞          1640         悬浮

消化液:取材进行原代培养时常常需要将组织块消化解离形成细胞悬液,传代培养时也需要将贴壁细胞从瓶壁上消化下来,常用的消化液有胰酶(Trypsin)溶液和EDTA溶液,有时也用胶原酶(collagenase)溶液。

1、胰酶溶液:胰酶活性可用消化酪蛋白的能力表示,常见有11251250,即一份胰酶可消化125250份酪蛋白。组织培养用胰酶溶液一般配制成0.1-0.25%浓度,配制时要用不含Ca2+    Mg2+及血清的平衡盐溶液(如前面的D-Hank's),因为这些物质会对胰酶产生抑制作用。胰酶作用及溶解的*pH8-9,配制胰酶溶液应将液体调至pH8左右,充分溶解,过滤除菌。过滤后可以再调只pH7.5,也可不调。

使用细胞清洗液配制胰酶消化液:含0.5%胰酶的细胞清洗液(100ml细胞清洗液加0.5g胰酶),过滤除菌,分装于4度保存。

2EDTA溶液:EDTA溶液也常用来解离细胞,它的作用机制是破坏细胞间的连接。对于一些贴壁特别牢固的细胞,还可以用EDTA和胰酶的混合液进行消化。EDTA溶液的使用浓度为0.02%,配制时应加碱助溶,配制后可过滤除菌,也可高温消毒灭菌。

3、胶原酶溶液:胶原酶在上皮类细胞原代培养时经常使用,胶原酶作用的对象是胶原组织,因此不容易对细胞产生损伤。胶原酶的使用浓度为0.1-0.3mg/L200000U/L,作用的*pH6.5。胶原酶不受Ca2+ Mg2+及血清的抑制,配制时可用PBS

UMUC3细胞株复苏失败原因分析

 

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