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上海恒远教你如何测定干扰素含量

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2017/5/5 10:41:10

    干扰素能刺激某些指示细胞(如人羊膜上皮细胞Wish株、人喉癌细胞株Hep-2、人胚肌皮、肺单层细胞等)产生抗病毒蛋白,从而使细胞免受水疱性口炎病毒(VSV)的攻击,根据待测样品不同稀释度的保护能力,计算出干扰素生物学活性单位。

【材料】 VSV、Wish细胞、MTT、二甲亚砜(DMSO)、10%FCS RPMI1640、培养板、培养瓶、CO2孵箱、超净台、酶标检测仪。

【结果】
以保护半数(50%)细胞免受病毒损害的zui高干扰素稀释度为1个干扰素活性单位。也可从标准曲线中求得待测样品的IFN活性单位。
【注意事项】
1、实验时先加IFN,后加指示细胞,以使细胞均匀分布于培养板底部。
2、本法对天然培养上清或重组IFN-α、IFN-β和IFN-γ均可检测其活性单位。

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