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westernblot基本原理

上海户实医药科技有限公司

2017/5/15 10:00:25

           一个基因表达*结果是产生相应的蛋白质(或酶)。因此检测蛋白质是测定基因表达的主要标志,检测蛋白质的方法很多,除elisa法外,也可用与检测dna和rna相类似的吸印方法。前两法有“南”和“北”之意,故本法遂被延伸称为western(西)印迹法,该法能用sds聚丙烯酰胺凝胶电泳分辨出与专一抗血清结合的专一性蛋白质。将聚丙烯酰胺凝胶上分辨出的蛋白质转移到硝酸纤维素膜上并与*抗体共孵。*抗体专一地与待分离蛋自质的抗原决定簇结合,然后用另一种蛋自质,如135i-蛋白a或辣根过氧化物酶连接的山羊抗igg检测已结合上去的抗体。本法所需时间6小时或过夜。 

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