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2017/5/25 11:47:12在这十多个必经步骤中,洗板、洗涤就有着两种不同的模式,说它简单又觉得复杂,说它不易做又觉得基本步骤也就那么些,其实只要我们在过程中稍加注意,再多了解就能做出漂亮的实验结果,酶联免疫分析试剂盒实验究竟都有哪些基本模式呢?
1、将病原体的抗原在碳酸盐缓冲液中4~C放置一个晚上包被,形成固相抗原,洗涤去除未与固相结合或结合不紧的抗原后,用小牛血清或牛血清白蛋白等封闭,洗涤去除未结合的部分及杂质。
2、加入含待测抗体的临床样本如血清等,温育一定时间后洗板;此时,待测抗体就会与固阳上特异抗原反应而吸附于固相上。
3、加入酶标记的抗人IgG抗体,温育一定时间后洗板;此时,在固相上即形成固相抗原—待测抗体—酶标二抗复合物。
4、加入酶底物,温育显色测定。间接法测抗体在目前应用zui多的是丙型肝炎病毒抗体(抗HCV)、人免疫缺陷病毒抗体(抗HIV)以及梅毒螺旋体抗体等的测定。从上述的测定模式可见,间接法测抗体,严格地讲,所测定的仅为抗体的IgG类,不涉及IgM和IgA类,这是由酶标二抗体所决定的。
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