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2017/9/1 0:23:43猪蓝耳病(PRRS)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒
试剂盒使用说明书
上海依赫生物ELISA试剂盒生产厂家 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定猪血清,血浆及相关液体样本中蓝耳病(PRRS)水平。
实验原理:
本试剂盒采用双抗体夹心法测定血清或血浆中猪蓝耳病(PRRS)。用纯化的猪蓝耳病(PRRS)抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中蓝耳病(PRRS)相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的蓝耳病(PRRS)抗体结合,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中猪蓝耳病(PRRS)的存在与否。
上海依赫生物ELISA试剂盒生产商
试剂盒组成:
试剂盒组成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
说明书 | 1份 | 1份 |
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封板膜 | 2片(48) | 2片(96) |
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密封袋 | 1个 | 1个 |
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酶标包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
阴性对照 | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
阳性对照 | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶标试剂 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
样品稀释液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
显色剂A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
显色剂B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
终止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
浓缩洗涤液 | (20ml×20倍)×1瓶 | (20ml×30倍)×1瓶 | 2-8℃保存 |
上海依赫生物ELISA试剂盒厂家
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
上海依赫生物ELISA试剂盒生产型厂家
操作步骤:
上海依赫生物ELISA试剂盒专业生产
结果判定:
试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.15
临界值(CUT OFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.10(阴性对照平均值低于0.05按0.05计算)
阴性判定:样品OD值< 临界值(CUT OFF)者为蓝耳病(PRRS)阴性
阳性判定:样品OD值≥ 临界值(CUT OFF)者为蓝耳病(PRRS)阳性
注意事项
1.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。
2.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
3.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
5.底物请避光保存。
6.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为630nm
7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸,使用时必须注意安全。
上海依赫生物ELISA试剂盒厂商
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月