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    PH值：葡萄糖氧化酶PH作用范围3.5~6.5，zui适pH为5.0左右，PH为4.5～7.0基本上相同，变化不大 ，pH高于7.0或低于4.5 活性急剧下降。但同样的pH条件下葡萄糖底物的存在对酶活性有保护作用，如pH在8.1时，当无葡萄糖底物的存在时，酶活性在10min内损失90%，当葡萄糖底物的存在时，酶活性在40min内仅损失20%,。低pH条件下，霉菌葡萄糖氧化酶仍然具有一定的催化活性，只是反映的速率较低，但仍然可以完成特殊的催化反应。

   温度：葡萄糖氧化酶的作用温度范围一般为30～60℃，zui适作用温度为50～55℃。葡萄糖氧化酶反应体系中含有气体反应物氧，所以反应温度的变化导致氧在反应体系中浓度的改变，因为温度升高时，反应体系中氧气的溶解度下降，这就抵消了温度升高对酶反应速率的影响。