紫外可见分光光度计光度重复性( Photometric Repeatability ) , 又称光度精密度( PhotometricPrecision) , 是紫外可见分光光度计的很重要的技术指标。它被定义为多次测量( 一般为3～5 次, 有时要求7 次) 中, 大值与小值之差。光度重复性还表征紫外可见分光光度计分析测试结果的可靠性。
一、光度重复性的测试方法
我国1996 年制订的紫外可见分光光度计国家计量检定规程规定, 光度重复性要测试3 次, 取3 次中的大小值之差作为光度重复性。光度重复性的测试方法是选定一个标准样品( 也可用使用者自己任选的样品) , 由同一个操作者,进行3～5 次测试, 再计算光度重复性。具体操作方法为: 仪器冷态开机(即关机2h 后开机) , 预热0. 5h 后, 对标准样品或使用者自选的样品进行光谱扫描, 而后在谱图上选择几个特征吸收峰, 检查在选定的测量次数内, 各个峰值的大小值之差即为光度重复性。人们经常将光度准确度和光度重复性在一次操作中完成。
仪器稳定可靠, 其中很重要的一点就是光度重复性好。可以设想: 一台紫外可见分光光度计, 它的功能很强大、自动化程度很高、外形美观、价格合理, 但它测出的数据不能重复, 那肯定不是好仪器。
二、影响光度重复性的主要因素
影响紫外可见分光光度计光度重复性的主要因素有以下几种。
1. 光源系统
光源系统即指灯泡和电源。如果氘灯或钨灯灯泡本身的质量不好, 即使电源很好, 氘灯或钨灯发出的光通量肯定不稳。这样, 紫外可见分光光度计就不可能得到好的、稳定的测试结果。如果氘灯或钨灯的灯泡很好, 但其电源不稳, 那么光源系统(灯泡) 发出的光通量也不可能稳, 也不可能得到好的光度重复性。
2. 光电转换器系统
光电转换器系统包括光电转换元件( 光电倍增管、光电管、硅光电池等)及其供电电源; 光电转换元件是将光信号转换成电信号的关键元件。不管紫外可见分光光度计的其他元部件( 如光电转换元件的供电电源) 多好, 如果光电转换元件不好( 如它一直在波动或漂移) , 就不可能得到好的光度重复性。
反之, 如果光电转换元件很好, 其供电电源不好, 电源一直在波动或漂移, 也不可能得到好的光度重复性。因此, 紫外可见分光光度计的制造者和使用者一定要高度重视光电转换器系统对光度重复性的影响。
3. 电学系统(放大器、V/ D 变换等)
如果电学系统不稳定, 也会影响光度重复性。如放大器有漂移、V/ D 变换不稳定, 都会使紫外可见分光光度计的分析测试结果不会重复。
4. 环境
如果周围有电场干扰、磁场干扰等, 也不可能得到好的光度重复性。放置紫外可见分光光度计仪器场所的温度、湿度, 也会影响仪器的光度重复性。因为仪器的电子元件, 一般都会受温度的影响而改变其性能。
紫外可见分光光度计的光度重复性的表示也应规范, 如果光度重复性设计指标为“0. 001Abs”, 因检测不出, 5 次测试的结果全是“0”, 此时正确的表示方法是写“ 光度重复性优于0. 001Ab s; 或小于0. 001Abs”。
