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抗原修复锅的使用方法

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2018/9/25 11:08:25

抗原修复锅Antigen Retriever

    
免疫组织化学方法成功与否关键在于抗原决定簇的保存和暴露.组织经甲醛固定.甲醛的醛基与

抗原蛋白的氨基交联,使决定簇的构像改变.从而影响检测蛋白表达.要充分暴露抗原决定簇,通

常用到抗原修复锅。强适于甲醛固定的组织,经石蜡包

埋后进行免疫染色前的处理,配合特别的抗原修复缓冲液确保你得到搞质量的免疫染色效

果。

· 一次可以在6中不同缓冲液中运行,进行抗原暴露

· 仅暴露抗原决定簇,不损伤组织的形态

· 实验结果稳定,结果重现性高

· 系列的玻片在独立环境中经过处理

抗原修复锅怎样工作?

    看上去,抗原修复锅似我们烹饪的高压锅。这是一款功能*的“高压锅,主要用于抗原暴露

的工作,主要的工作原理也是装玻片的几个分室可以达到高温(>120°C)高压。灵敏的传感控制

器来保持一定的温度和压力及一定的时间,这些工作参数都是经过严格的科学实验得到的数

据。当达到需要的温度,抗原修复锅会在该温度下保持几分钟,之后锅内玻片被冷却2个多小

时,特殊设材质的内锅体控制了锅和玻片的冷却速度。 

谁是受益人?

    研究病理的实验室,那里需要高质量染色照片(用来发表)的

    缺乏技术人员的实验室,学生和博士后均可以处理玻片进行组织染色,且不需要很多时间来摸索

    小型病理实验室,每天处理的玻片数量有限

怎样选择一种缓冲液(Buffer

    如果你已经知道哪种缓冲液用在微波的某种组织抗原修复,那么用抗原修复锅时,这种缓冲

液也同时适用的机会很大。我们提供四种即用型缓冲液R-Buffer A/B/C/U,同时也提供同种更加

温和的组织处理缓冲液,我们称之G系列,R-Buffer AG/BG/CG/UG

    
选择Buffer,主要考虑以下两点:


1.  抗原的自然特性以及所选择的抗体


抗原自身特性和抗原的位置都是首要考虑。我们建议你刚开始的时候选择抗原表达环境的

适Buffer。以下是经验供大家参考:

Most of the nuclear antigens (apoptosis-related, survival-related, proliferation-r

elated) R: Buffer A (or AG).

Cell adhesion molecules, cell membrane antigens (extracellular domain) R: Buffer A (or AG)

Cytoskeleton and cytoskeleton-associated molecules – R:Buffer A (or AG)

Intracellular domain of some adhesion molecules and surface receptors – R:Buffer B (or BG)

Intracellular domain of some adhesion molecules and surface receptors – R:Buffer C (or CG)

Most of antibodies raised against a linear peptide – R: Buffer U (or UG)

2.  固定液以及固定程度

建议的组织切片的抗原修复处理是一种针对普通的适化状态切片。如果用来切片的组织块没有

充分固定,或者过固定(留在福尔马林溶液中时间过长),或者用了其它的固定液,那么,处

理组织切片的流程方案需要重新修订,便利的办法是选择使用G系列缓冲液。对于过固定的

材料一般推荐用U buffer,或者在同一Buffer里面增加循环

 

抗原修复锅技术参数:

Heigh

335 mm

Capacity

9 litres

Max. Instrument length

228 mm

Width.

340 mm

Net Weight

4.5 kilos

Internal chamber Dimensions (d/h)

210/230 mm

Max. Load Weight

3.0kg

Max. Single Fault Temperature

133.3°C


使用抗原修复锅进行染色的效果示例


1.福尔马林固定,石蜡包埋,人乙状结肠组织切片,经抗原修复锅进行抗原暴露,R-

Buffer C (pH 6.0),组织玻片降温过夜,抗体MIB-1,抗原Ki-67R-Detect HRP系统染色

 

2. .福尔马林固定,石蜡包埋,人乙状结肠组织切片,经抗原修复锅进行抗原暴露,R-

Buffer A (pH 8.1),组织玻片降温过夜,抗体#4B11,抗原CD8 (cell membrane)R-

Detect HRP系统染色.

仪器及配件的选购:

货号

产品名称

规格

62700-20

Retriever 220 volt (内含3chamber

1

62705-01

Slide Chamber

3/pk

62705-02

Chamber Rack

1

62705-03

Lifting Device

1

62705-05

Cord Set (Europe)

1

缓冲液的选购:

货号

产品名称

规格

62706-10

R-Buffer A (10x)

250 ml

62706-11

R-Buffer B (10x)

250 ml

62706-12

R-Buffer C (10x)

250 ml

62706-13

R-Buffer U (10x)

250 ml

62707-10

R-Buffer AG (2x)

250 ml

62707-11

R-Buffer BG (2x)

250 ml

62707-12

R-Buffer CG (2x)

250 ml

62707-13

R-Buffer UG (2x)

250 ml

 

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