抗原修复锅的使用方法

抗原修复锅Antigen Retriever

    
免疫组织化学方法成功与否关键在于抗原决定簇的保存和暴露.组织经甲醛固定.甲醛的醛基与

抗原蛋白的氨基交联,使决定簇的构像改变.从而影响检测蛋白表达.要充分暴露抗原决定簇，通

常用到抗原修复锅。强适于甲醛固定的组织，经石蜡包

埋后进行免疫染色前的处理，配合特别的抗原修复缓冲液确保你得到搞质量的免疫染色效

果。

· 一次可以在6中不同缓冲液中运行，进行抗原暴露

· 仅暴露抗原决定簇，不损伤组织的形态

· 实验结果稳定，结果重现性高

· 系列的玻片在独立环境中经过处理

抗原修复锅怎样工作？

    看上去，抗原修复锅似我们烹饪的高压锅。这是一款功能*的“高压锅”，主要用于抗原暴露

的工作，主要的工作原理也是装玻片的几个分室可以达到高温(>120°C)高压。灵敏的传感控制

器来保持一定的温度和压力及一定的时间，这些工作参数都是经过严格的科学实验得到的数

据。当达到需要的温度，抗原修复锅会在该温度下保持几分钟，之后锅内玻片被冷却2个多小

时，特殊设材质的内锅体控制了锅和玻片的冷却速度。 

谁是受益人？

    研究病理的实验室，那里需要高质量染色照片（用来发表）的

    缺乏技术人员的实验室，学生和博士后均可以处理玻片进行组织染色，且不需要很多时间来摸索

    小型病理实验室，每天处理的玻片数量有限

怎样选择一种缓冲液（Buffer）

    如果你已经知道哪种缓冲液用在微波的某种组织抗原修复，那么用抗原修复锅时，这种缓冲

液也同时适用的机会很大。我们提供四种即用型缓冲液R-Buffer A/B/C/U，同时也提供同种更加

温和的组织处理缓冲液，我们称之G系列，R-Buffer AG/BG/CG/UG。

    
选择Buffer，主要考虑以下两点：

1.  抗原的自然特性以及所选择的抗体

抗原自身特性和抗原的位置都是首要考虑。我们建议你刚开始的时候选择抗原表达环境的

适Buffer。以下是经验供大家参考：

Most of the nuclear antigens (apoptosis-related, survival-related, proliferation-r

elated) R: Buffer A (or AG).

Cell adhesion molecules, cell membrane antigens (extracellular domain) R: Buffer A (or AG)

Cytoskeleton and cytoskeleton-associated molecules – R:Buffer A (or AG)

Intracellular domain of some adhesion molecules and surface receptors – R:Buffer B (or BG)

Intracellular domain of some adhesion molecules and surface receptors – R:Buffer C (or CG)

Most of antibodies raised against a linear peptide – R: Buffer U (or UG)

2.  固定液以及固定程度

建议的组织切片的抗原修复处理是一种针对普通的适化状态切片。如果用来切片的组织块没有

充分固定，或者过固定（留在福尔马林溶液中时间过长），或者用了其它的固定液，那么，处

理组织切片的流程方案需要重新修订，便利的办法是选择使用G系列缓冲液。对于过固定的

材料一般推荐用U buffer，或者在同一Buffer里面增加循环

抗原修复锅技术参数：

使用抗原修复锅进行染色的效果示例

1.福尔马林固定，石蜡包埋，人乙状结肠组织切片，经抗原修复锅进行抗原暴露，R-

Buffer C (pH 6.0)，组织玻片降温过夜，抗体MIB-1，抗原Ki-67，R-Detect HRP系统染色

2. .福尔马林固定，石蜡包埋，人乙状结肠组织切片，经抗原修复锅进行抗原暴露，R-

Buffer A (pH 8.1)，组织玻片降温过夜，抗体#4B11，抗原CD8 (cell membrane)，R-

Detect HRP系统染色.

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