Qubit荧光计配套检测试剂盒如何挑选？

苏州蚂蚁淘生物科技有限公司代理销售赛默飞invitrogen公司的Qubit荧光计配套检测试剂盒。

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该类试剂盒分型很多，许多客户不知道如何挑选，现整理如下：

灵敏的靶向特异性定量试剂

Invitrogen qubit检测试剂运用简易的混合-读数形式，可使用qubit荧光定量仪进行读数，仅需低至2分钟的孵育时间。 qubit检测试剂盒中使用的染料仅会在与靶向分子发生特异性结合时发出荧光，从而小化污染物（包括降解DNA或RNA）对结果的影响。

qubit检测试剂盒

qubit检测试剂盒提供了浓缩的检测试剂、稀释缓冲液和预稀释的标准品。 只需简单地使用已提供的缓冲液对试剂进行稀释，加入您的样品（从1 μL至20 μL的任意体积均可），然后就可使用Invitrogen qubit 4型荧光定量仪读取浓度值（图1）。 该检测在室温下即可进行，信号可保持3小时稳定。

所有的qubit检测均依照相同的常规操作流程进行，运用简易的混合-读取形式，对于DNA和RNA检测仅需2分钟的孵育时间，对于蛋白质检测需要孵育15分钟。 qubit 4型荧光定量仪自带可支持多达1000例样品数据的存储容量，您也可以使用USB数据线或USB移动存储设备来转移数据。

除了用于dsDNA、寡核苷酸、总RNA、microRNA、蛋白质的核心检测试剂外，也可使用Ion Sphere质控试剂盒，在使用Ion Personal Genome Machine（PGM）测序仪进行测序前，通过qubit 4型荧光定量仪对Ion Sphere的微粒质量进行评估。

图 1. qubit定量检测流程。 结合qubit 4型荧光定量仪使用时，Invitrogen qubit定量检测试剂盒拥有无缝的工作流程，可轻松完成数据收集。 qubit检测试剂盒提供了浓缩的检测试剂、稀释缓冲液和预稀释的标准品。 只需简单地使用已提供的缓冲液对试剂进行稀释，加入您的样品（从1 μL至20 μL的任意体积均可），然后就可使用qubit 4型荧光定量仪读取浓度值。 该检测在室温下即可进行，信号可保持3小时稳定。

敬请注意： 除microRNA及Myqubit检测试剂盒外，所有的qubit检测试剂盒均可用于Invitrogen qubit 3.0及2.0款荧光定量仪，以及初的Invitrogen qubit（1.0）荧光定量仪。microRNA及Myqubit检测试剂盒仅适用于qubit 4、3.0及2.0型荧光定量仪，而RNA IQ检测试剂盒仅适用于qubit 4型荧光定量仪。

您是否需要更高通量的定量方法？

当您需要定量1-20个样品时，qubit检测试剂是非常合适的（使用qubit 4型荧光定量仪进行读数）。
而对于20-2000+例样品，您可使用用于使用微孔平板进行核酸定量或蛋白质定量的Invitrogen Quant-iT检测试剂盒和试剂。

            根据靶向分子选择qubit检测试剂盒

1、dsDNA

Invitrogen qubit dsDNA BR（宽检出范围）试剂盒和HS（高灵敏度）试剂盒经专门设计，可轻松进行的DNA定量。 相比RNA，这些试剂盒对于双链DNA（dsDNA）有着高度选择性。 该检测试剂盒对于常见污染，如盐、自由核苷酸、溶剂、变性剂或蛋白质等，有着很好的适应性。

为了测定样品纯度，您可以配合使用Invitrogen qubit dsDNA检测试剂盒和qubit RNA检测试剂盒。 这些检测方法相比A₂₆₀/A₂₈₀检测方法可以为您更好地指示样品纯度。 要检测核酸样品中的蛋白污染，只需简单地将1至20 μL样品加入至Invitrogen qubit蛋白检测试剂中即可。

2、总RNA

qubit RNA iQ检测试剂可对RNA完整度和质量进行高度和灵敏的测定，可用于如二代测序和RNA测序等重要应用。  准确了解有多少可用RNA和降解RNA现在可以非常简单快速，只需花费5分钟进行混合和读数即可得到结果。 Invitrogen qubit RNA XR（扩展范围）试剂盒和HS（高灵敏度）试剂盒可轻松进行的RNA定量。 相比双链DNA（dsDNA），这些试剂盒对于RNA有着高度选择性，其中BR检测试剂可完成样品原始浓度在1 ng/μL至1 μg/μL内的测定，检测范围为20–1000 ng，而HS检测试剂则可用于样品原始浓度在250 pg/μL至100 ng/μL内，检测范围为5–100 ng的测定。 该检测试剂盒对于常见污染，如盐、自由核苷酸、溶剂、变性剂或蛋白质等，有着很好的适应性。

为了测定样品纯度，您可以配合使用qubit dsDNA检测试剂盒和qubit RNA检测试剂盒。 这些检测方法相比A₂₆₀/A₂₈₀检测方法可以为您更好的指示样品纯度。 要检测核酸样品中的蛋白污染，只需简单地将1至20 μL样品加入至qubit蛋白检测试剂中即可。

3、microRNA

Invitrogen qubit microRNA检测试剂盒设计用于对如microRNA等小RNA（17–25 nt或bp）进行简易的定量，即使存在如盐、自由核苷酸、溶剂、去污剂或蛋白质等常规污染等也可完成测定。 相比rRNA或较大的mRNA (>1,000 bp)，该检测试剂对于小RNA有高度选择性。 我们可以对样品管中低至0.5 ng水平的纯化样品中的小RNA进行高重复性的定量（按照已提供的用户手册中的实验流程进行）。 这款检测试剂可检测所有类型的小RNA，包括microRNA和siRNA，单链或双链均可。 该检测试剂在核心检测范围内的动态检测范围为5 ng/mL至500 ng/mL (1–500 ng) ，而在扩展检测范围内可检测低至2.5 ng/mL (0.5 ng) 的样品。 该检测试剂可完成样品原始浓度在0.05 ng/μL至100 ng/μL内的测定。

• 请阅读BioProbes 70文章 - 传统和高通量测定法的基于荧光的小RNA定量

4、ssDNA

Invitrogen qubit ssDNA检测试剂盒使得DNA定量更轻松更。 该检测试剂可完成样品原始浓度在50 pg/μL至200 ng/μL内的测定，检测范围为1–200 ng。 该检测在室温下即可进行，信号可稳定保持30分钟。 该检测试剂盒对于常见污染，如盐、自由核苷酸、溶剂、去污剂或蛋白质等，有着很好的适应性。

5、蛋白质

Invitrogen qubit蛋白质检测试剂盒使得蛋白质定量更轻松更。 该检测试剂可完成样品原始浓度在12.5 μg/mL至5 mg/mL内的测定，表现出较低的蛋白质间差异。 该检测试剂对于常见污染，如还原性试剂（DTT、β-巯基乙醇）、盐、自由核苷酸、氨基酸、溶剂和DNA等（不包括去污剂），有着良好的适应性；对于其他污染，需要轻微修改实验流程。