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日本乙脑抗体检测检测试剂盒说明书

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2019/7/24 16:48:38

日本乙型脑炎病毒抗体检测检测试剂盒说明书

广州健仑生物科技有限公司

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【产品名称】:日本乙型脑炎病毒抗体检测检测试剂盒

【原理】

    日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)是流行性乙型脑炎(简称乙脑)的病原体。乙脑是严重威胁人畜健康的一种急性传染病,可引起母猪流产、死胎、早产,病死率高。猪感染JEV病毒后,在血清中能检测到特异性抗体。因此检测特异性猪乙脑抗体,可作为猪场乙脑疫苗的免疫监测及该病辅助检测指标。

    本试剂盒采用ELISA方法检测猪血清中的特异性抗体。本试剂盒灵敏度高,特异性强,重复性好,操作方便快速,可分多次使用。

【试剂组成】

1.预包被板

48T/96T;

 

7. 终止液(6号液)

1支;

2.酶结合物(1号液)

1支;

 

8. 阳性对照品

1支;

3.浓缩洗涤液(2号液)

1支;

 

9. 阴性对照品

1支;

4.底物(3号液)

1支;

 

10.不干胶膜

1/2片;

5.显色剂(4号液)

1支;

 

11.自封袋

1个;

6.样本稀释液(5号液)

1支;

 

12.使用说明书

1份;



【操作程序】

1.洗涤液配制 用蒸馏水或去离子水将浓缩洗涤液(2号液)按1:10稀释,如取50ml浓缩液与450ml蒸馏水或去离子水充分混匀即为工作洗涤液。

2.样本稀释   用样本稀释液(5号液)将待检血清样本按1:100稀释,如取5ul样本与495ul样本稀释液,混匀。阴性、阳性对照品不用稀释,直接加样。

3.加样反应   每次试验设阴性对照2孔、阳性及空白对照各1孔(分别加入阴性、阳性对照及样本稀释液100ul)。样本检测孔每孔加已稀释血清样本100ul。37℃避光反应30分钟后,甩去孔内液体,每孔注满工作洗涤液洗涤3次,每次均需停留1分钟后再甩净,拍干。

4. 加酶反应   除空白对照孔外,每孔加酶结合物(1号液) 1滴。37℃避光反应30分钟后,甩去孔内液体,如上洗涤,拍干。

5.显色反应   加底物液(3号液)和显色剂(4号液)各1滴,混匀,37℃避光显色10分钟。加终止液(6号液)1滴,终止反应(加终止液后,蓝色会变为黄色)并判读结果。

【结果判断】

    阴性对照呈无色或浅黄色,阳性对照呈明显黄色,表示试验有效。

    以空白对照调零,用酶标仪于450nm(630nm作参比波长)读取吸光度(A值)。待检孔A值大于阴性对照A值平均值的2.1倍者判为阳性。如阴性对照A值的平均值低于0.08时按0.08计算。

【注意事项】

1.试剂盒于2-8℃保存,有效期6个月。每次使用前应先平衡至室温。

2.未使用完的板条应密封保存。

3.试剂盒中终止液具有腐蚀性,要小心使用。

4.瓶盖每次使用后要拧紧,各瓶盖之间不可混用。不同批号试剂盒的试剂组份不可混用。

5.试验样本应为无染菌、无血脂、无溶血的血清。任何样本都应视为传染源妥善处理。

6. 37℃孵育时,建议使用水浴箱。如无条件,可在温箱中放置湿盒进行反应并同时用不干胶膜封盖板孔。

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