动物疫病血凝分析仪

动物疫病血凝分析仪型号：DY-7000

DY-7000动物疫病血凝分析仪广泛于动物疫病预防控制中心、动物防疫监督所、兽医药品监察所、兽医研究所、大学、疫苗生产和大中型饲养企业等单位。 
DY-7000动物疫病血凝分析仪是根据国标中重大疫病免疫监测方法研制的设备，配套使用自动血凝分析管理软件，能自动监测常见重大动物疫病的免疫抗体效价，及时掌握动物疫病流行规律和疫情动态，建立动物免疫效果监测记录档案。系统当前监测项目有：猪瘟抗体正向间接血凝检测、口蹄疫抗体正向间接血凝检测、高致病性禽流感H5亚型抗体血凝抑制检测、高致病性禽流感H7亚型抗体血凝抑制检测、高致病性禽流感H9亚型抗体血凝抑制检测、新城疫抗体血凝抑制检测。 

试验方法： 
1 血凝（HA）试验 
1） 在V型微量反应板的1～12孔均孔加入0.025ml PBS，换滴头。 
2） 吸取0.025ml血凝抗原加入孔，混匀。 
3） 从第1孔吸取0.025ml血凝抗原加入第2孔，混匀后吸取0.025ml加入第3孔，如此进行对倍稀释至第11孔，从第11孔吸取0.025ml弃去，换滴头。 
4） 每孔再加0.025ml PBS。 
5） 每孔均加入0.025ml 1%（V/V）鸡红细胞悬液（将鸡红细胞悬液充分摇匀后加入）。 
6） 将反应板在振荡器上震荡1～2分钟或轻扣反应板混合反应物，在室温（20～25℃）下静置40分钟后观察结果，（如果环境温度太高，可置4℃环境下），在对照孔红细胞显著呈钮扣状时判定结果。 
7） 结果判定  将板倾斜，观察红细胞有无呈泪滴状流淌。*血凝（不流淌）的抗原或病 释倍数代表一个血凝单位（HAU）。 
2  血凝抑制（HI）试验 
1） 根据HA试验测定的效价，计算配制4个血凝单位(4HAU)抗原。以*血 AU抗原的稀释倍数应是1:64（256除以4）。 
2） 加稀释液： 
在微量反应板的第1～11孔加入0.025ml PBS，第12孔加入0.05ml PBS。 
3） 稀释待检血清： 
取1号待检血清0.025ml加入排第1孔，充分混匀后吸0.025ml于第2孔，依次对倍稀释至第10孔，从第10孔吸取0.025ml弃去。 
取2号待检血清加入第2排；取3号待检血清加入第3排……均按上法稀释。 
  注意！每取一份血清时，必须更换吸头。 
4） 稀释阴性血清： 
  在血凝板的第7排孔加阴性血清0.025ml，对倍稀释至第3孔，混匀后从该孔取出0.025ml弃去。 
    5） 稀释阳性血清： 
  在血凝板的第8排第1孔加阳性血清0.025ml，对倍稀释至第10孔，混匀后从该孔取出0.025ml弃去。 
6） 第1～11孔均加入含4HAU混匀的病毒抗原液0.025ml，在室温（20～25℃）下静置30分钟或2～8℃ 50分钟。 
7） 每孔加入0.025ml 1%（V/V）的鸡红细胞悬液，震荡混匀，在室温（20～25℃）下静置20～30分钟或2～8℃ 45～60分钟，对照红细胞将呈明显钮扣状沉于孔底。 
结果判定  
以*抑制4 H 倍数判为该血清的HI效价。 
只有阴性对照孔血清滴度不大于2log2，阳性对照血清误差不过1个滴度，试验结果才有效。 
禽流感灭活疫苗的免疫效果判定：家禽免疫后21天进行免疫效果监测。禽流感抗体血凝抑制（HI）抗体效价≥24判定为合格 
存栏家禽抗体合格率达到≥70%判定为合格。 
新城疫免疫效果监测：免疫21天后，进行免疫效果监测。抗体血凝抑制试验抗体效价≥25判定为合格 
存栏家禽抗体合格率达到≥70%判定为合格。 

【注意事项】  
（1）HA和HI试验影响因素甚多，应严格控制试验条件。每加一试剂或样品后需更换吸头，同时应严格控制作用温度和时间。 
（2）准确配制红细胞悬液，使用时应随时振摇。 
（3）用pH值7.0～7.2的PBS作为稀释液。 
（4）抗原和阴、阳性血清若有污染，应废弃。 
（5）准确配制4HAU抗原，使用前需进行滴定，滴定好的抗原应在2小时内用完。 
（6）抗原和血清按规定保存。冻干试剂应按规定的体积用PBS溶解。溶解后2～8℃保存不过1个月；可分装成小包装，-70℃冻存，随用随取。切忌反复冻融。 
（7）鸭、鹅以及哺乳动物的血清一般需进行非特异性凝集和抑制素的处理。 
（8）同一亚型不同毒株的HI试验抗原，若抗原性存在差异，则检测同一血清的HI效价不同。 
（9）在使用微量加样器时，枪头进入试剂瓶面下约2~3ml深处，不可过深。待枪头撤出液面后斜贴在试剂瓶的瓶壁上，淌走多 悬 现配现用，剩余的放于4℃保存，如果出现溶血现象则不能使用。 
（11）每次检测可只做一份阴阳性血清对照试验。 
（12）试验完成 即上机判读，否则易出现红细胞下滑现象。 
（13）冻干对照血清和抗原存放于-20℃，溶解过后存放于4℃。