(一)设定容量值
Pipetman P加样器容量计读数由三位数字组成(显示所转移液体容量),读数到个
位数。Eppendorf Research加样器容量计读数则由四位数字组成,读数到小数后一位,从上(zui大有效数字)到下(zui小有效数字)读取。利用底部刻度可将容量调节到更的分度。Pipetman P根据型号不同,数字可能是黑色或红色的。Eppendorf Research加样器的数字不同型号均为白色。
转动加样器的黑色调节环或按钮的白色调节旋钮均可设定容量。用白色调节旋钮设定容量比较方便和快速,尤其是穿戴手套时。使用黑色调节环可较准确调节到设定值。
(二)吸液
首先选择一支合适的吸头安放在加样器套筒上。使用P5000及P10ML时,装吸头前必在套筒上加插一过滤芯。稍加扭转压紧吸头使之与套筒间无空气间隙。未装吸头的加样器绝不可用来吸取任何液体。
标准吸液步骤如下:
1.把按钮压至*停点。
2.垂直握持加样器,使吸头浸入液样中,浸入液体深度视型号而定。
3.缓慢、平稳地松开按钮,吸液样。等1s,然后将吸头提离液面。用药用吸纸抹去吸嘴外面可能附着的液滴。小心勿触及吸头口。
(三)放液
1.将吸头口贴到容器内壁并保持100~400倾斜 2.平稳地把按钮压到*停点。等1s后再把按钮压至第二停点以排出剩余液体。
3.压住按钮,同时提起加样器,使吸头贴容器壁擦过。
4.松开按钮。
5.按吸头弹射器除去吸头(只有改用不同液体时才需更换吸头)。
(四)预洗
当装上一个新吸头(或改变吸取的容量值)时应预洗吸头,先吸人1次液样并将之排回原容器中。
预洗新吸头能有效提高移液的度和重现性。这是因为*次吸取的液体会在吸头内壁形成液膜,导致计量误差。而同一吸头在连续操作时液膜相对保持不变,故第2次吸液时误差即可消除。
(五)致密及黏稠液体
对于密度低于水的液体,可将容量计的读数调到低于所需值来进行补偿。
例如:用P20移液器转移10/11血清。先将读数调到10//1,吸取后以重量法测定。如实测体积为9.5/1l,即偏差0.5/11,则将读数调到10.5Pl并重复1次。如第2次测定仍不够准确,根据偏差再作调整。
排放致密或黏稠液体时,宜在*停点多等1~2s再压到第二停点。
对密度高、黏稠大或挥发性的液体,推荐使用活塞正移动加样器。
(六)加样器吸头
加样器吸头是整个移液系统的有机组成部分,对其基本要求是,必须有高机械、热力学和化学稳定性,且纯度高,生产过程纯净,无有机或化学物质(如染料)和重金属污染。选择密封良好的环口、薄壁和嘴口尖细的吸头,将使得在加样时,吸头的安装或卸脱更加容易。吸头管壁有弹性,加样吸液时不会产生漩涡,这样加样的精度就更高。吸头嘴口无毛刺,表面光洁平滑,使得其沾湿性极小,可避免液体滞留外壁引起的误差。吸头应与加样器上吸头套筒密封完好,可防止由于空气泄漏而造成加样精度或准确度的误差。此外,吸头还应有液体容积刻度线。D200吸头在20/1l和100~1处有标记;D1000吸头在300~1处有标记,D10吸头在2/A1处有标记。zui后,吸头应可在121℃下消毒20min。
如果在使用加样器加样中,想避免样品与样品、样品与加样器或样品与操作人员之间的污染,建议使用Diamond带滤芯吸头。Diamond带滤芯吸头可以经高温消毒,其内置滤芯不会损坏。
(七)注意事项
实验室基本上以使用连续可调的加样器为主。连续可调式加样器在使用时应注意以下几点,从而使加样器能发挥*性能。
1.取液之前,所取液体应在室温(15—25℃)平衡。
2.操作时要慢和稳。
3.连续可调式加样器在取样加样过程中应注意移液吸头不能触及其他物品,以免被污染;移液吸头盒(架子)、废液瓶、所取试剂及加样的样品管应摆放合理,以方便操作过程、避免污染为原则。
4.连续可调式加样器在使用完毕后应置于加样器架上,远离潮湿及腐蚀性物质。
5.吸头浸入液体深度要合适,吸液过程尽量保持不变。
6.改吸不同液体、样品或试剂前要换新吸头。
7.发现吸头内有残液时必须更换。
8.新吸头使用前应先预测。
9.为防止液体进入加样器套筒内,必须注意以下几点:
①压放按钮时保持平稳;
②加样器不得倒转;
③吸头中有液体时不可将加样器平放;
④P5000及P10ML加样器一定要加滤芯。
10.勿用油脂等润滑活塞或密封圈。
11.不可把容量计数调超其适用范围。
12.液体温度与室温有异时,将吸头预洗多次再用。
13.移液温度不得超过70℃。
14.使用了酸或有腐蚀蒸气的溶液后,拆下套筒,用蒸馏水清洗活塞及密封圈。
15.连续可调式加样器在使用完毕后应置于加样器架上,远离潮湿及腐蚀性物质。
(八)故障排除
工作中如发现加样器漏气或计量不准,其可能原因及解决方法为:
1.套筒螺帽松动 用手拧紧螺帽。
2.套筒刮花或破裂 卸下弹射器,检查套筒。P2,P10或P20加样器套筒破损时,活塞也可能变形。安装套筒时应用手拧紧螺帽。
3.活塞或密封受化学腐蚀 更换活塞和密封圈。用蒸馏水洗涤套筒内壁。
发现套筒内有液体,可依下法清洁:卸下弹射器,拧下螺帽并用蒸馏水洗涤套筒、活塞、密封圈及O形环,待*干燥后重新组装。
发现P5000及P10ML滤芯变湿必须更换。
需要时,可将套筒、螺帽和弹射器在121~C消毒20rain。注意密封圈及O形环不能高温消毒。
4.发现吸液时有气泡
①将液体排回原容器;
②检查吸头浸入液体是否合适;
③更慢地吸人液体,如仍有气泡应更换吸头。
凡是更换了活塞或操作杆的加样器需进行全面调校。