昆虫多功能氧化酶（MFO）ELISA试剂盒

昆虫多功能氧化酶(MFO)ELISA试剂盒依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

试剂盒规格及配置  

自备物品

①.酶标仪（450nm）

②.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

③.37℃恒温箱

操作步骤

①．从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

②．设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

③．样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。

④．除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

⑤．弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次   （也可用洗板机洗板）。

⑥．每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

⑦．每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

结果判断

绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。