粪便中蠕虫卵显微镜检定定量加藤板
1.做粪样前请提前至少24小时将玻璃纸浸泡在透明染液中;(非常重要)
2.每份粪样取3张载玻片进行编号(与待检粪样的编号相同)
3.打开待检粪样的包装,将尼龙网至于待检粪样上,用塑料刮片轻压尼龙网片并在其上轻刮,使细粪渣透过尼龙网片的微孔滤出至尼龙网表面;
4.将定量板放在载玻片中部,然后用刮片将网片表面的细粪渣填入定量板的中央孔内,填满全孔并抹平;
5.小心移去定量板,使粪样留在载玻片上;
6.取一张浸泡好的亲水玻璃纸,抖掉多余的浸泡液,盖在粪样上,用另外一块较厚的载玻片覆于玻璃纸上垂直均匀用力压制,使粪便均匀地展开于玻璃纸下;
7.将制作好的加藤片置于样本盒内(内垫吸水纸,加樟脑丸),并置于室温下透明过夜待检(建议隔夜放置12小时以上);如冬季室温达不到25℃时,可将加藤片置于25℃恒温箱内以加快透明,以待观察结果。
结果判读:
若结果定性,只需记录观察到的蠕虫卵种类;若结果需定量,需要分别记录所观察的蠕虫卵种类,并需要计算出每克粪便中的虫卵数(Per Gram Egg,EPG),计算公式:单张加藤片蠕虫卵的平均数×24。隔夜透明的加藤片往往不易观察到钩虫卵(钩虫卵一般在透明2小时内可以观察到)。
四、注意事项
1.使用前按说明书清点核对试剂和材料是否完整。
2.试剂盒在常温下运输与保存,有效期2年以上,长期保存透明染液宜放置4℃保存。试剂盒使用前需在室温放置平衡15min。
3.为避免交叉污染,尼龙网、玻璃纸用完后不能重复使用,刮片与定量板重复利用需要按照生物安全规范处理后使用,但不建议重复使用。
4.制作加藤片建议在操作台上放置1次性桌布,可避免粪便污染台面,造成生物安全危害。
5.实验的废弃物处理严格按照有关实验室生物安全规范进行处置(加84消毒液或75%酒精溶液,或焚烧或掩埋)。