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2020/1/6 13:15:221. 仪器安装:
将配件中的硅胶管根据实际需求剪成不同的长度,按照上面左侧示意图连接好(注意接紧,止漏水)。蒸馏水和碱液的硅胶管另一端必须浸泡在所对应的液面以下。蒸馏水出口和冷却水出口的硅胶管另一端放入排水池(桶)。冷却水连接自来水。在仪器正面左侧托盘上安放空的消化管,右侧放锥形瓶,插入带橡皮塞的玻璃嘴。
2. 仪器检测:
⑴.打开冷却水(水开关),注意流量,控制在3-4L/分钟。接上电源线,打开电源总开关。仪器开始自动加水,从侧面烧杯水位观测口可以看见烧杯内的水位上升,一段时间后会自动停止加水(由系统内水位探针自动控制,水位不足会持续加水)。
⑵.打开加碱按钮,加碱量大概在30mL左右时,关闭加碱按钮.接着打开蒸馏按钮,仪器开始蒸馏。仪器工作10分钟左右(锥形瓶内液体在100-150mL左右),关闭蒸馏按钮(灯熄灭),仪器停止蒸馏,整机检测完成。
3. 实验蒸馏:
在消化管托盘上换上已消化完成并冷却稀释后(一般加20ml蒸馏水稀释)的样品,右侧换成准备好的锥形瓶(锥形瓶内加入50ml硼酸和4-5滴混合指示剂,具体硼酸量由各自实验情况确定),调整氨气回流玻璃嘴和瓶塞,使玻璃嘴浸泡在硼酸液面以下。
然后先打开加碱按钮,加到自己所需要的碱的用量后(确保液体颜色变黑为止),关闭加碱按钮。然后再打开蒸馏按钮。
蒸馏即将完成时(一般蒸馏时间8-12分钟左右,锥形瓶内液体在150-200ml左右),提起橡皮塞,移开锥形瓶,使氨气回流玻璃嘴离开液面,用蒸馏水冲洗玻璃嘴外壁,继续蒸馏10秒钟后,关闭蒸馏按钮,取下锥形瓶待滴定用。
注意:更换样品蒸馏时不需要关闭电源总开关。
4.滴定/计算(以下数据仅供参考,以本行业标准为主)
用0.05mol/LHCL滴定接收瓶内的溶液,滴定至(暗)灰色时为止,记下消耗HCL的毫升数,按下列式子计算蛋白含量:
蛋白质%=
式中: V1—样品消耗硫酸或盐酸标准液的体积,ml;
V2—试剂空白消耗硫酸或盐酸标准液的体积,ml;
N—硫酸或盐酸标准溶液当量浓度;
0.014—1N硫酸或盐酸标准溶液1ml相当于氮克数;
m—样品的(体积),g(ml);
F—蛋白质系数,按16%计算乘以6.25即为蛋白质。
(空白测定:用0.1克糖代替样品或不加样品作空白测定)
5. 清洗/关机
先换上空的消化管和锥形瓶,把连碱的硅胶管换成新的一个硅胶管,另一端放入蒸馏水容器内,然后按蒸馏按钮,用蒸馏水清洗碱泵,一般30秒钟左右后取下碱进硅胶管,排空碱路里面的液体。
然后关闭冷却水(自来水),打开蒸馏水排水开关,排完蒸馏水。后关闭总电源开关,拔掉电源线。(后一天实验做完后必须进行关机清洗操作)。