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haemtech人类抗凝血酶III

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2020/2/27 16:02:22

haemtech人类抗凝血酶III

 

抗凝血酶III的域结构抗
凝血酶III包含三个链内二硫键(-SS-),富含碳水化合物的域(CHO),NH2末端肝素结合域和COOH末端丝氨酸蛋白酶结合域。

 

 

 

 

 

 

 

抗凝血酶III(ATIII)是单链糖蛋白,分子量为58,000。它是丝氨酸蛋白酶抑制剂(丝氨酸蛋白酶抑制剂)超家族的成员,被认为是凝血级联反应中重要的抑制剂(1,2)。ATIII抑制广泛的丝氨酸蛋白酶,包括凝血酶,因子IXa,Xa和XIa,激肽释放酶,纤溶酶,尿激酶,C1酯酶和胰蛋白酶。抑制机制涉及在蛋白酶的活性位点与ATIII的易断裂键(Arg 385-Ser 386)之间形成稳定的1:1复合物。凝血酶的活性位点丝氨酸已显示与ATIII的P1氨基酸(Arg 385)形成共价中间体。肝素可不同程度地提高ATIII对丝氨酸蛋白酶的抑制率。如果是凝血酶抑制剂或Xa因子抑制剂,在肝素存在下,与ATIII的相互作用增强了3个数量级。ATIII和肝素之间的相互作用涉及肝素上的硫酸化和非硫酸化单糖单元的*序列,以及ATIII上的关键赖氨酸残基。已经证明ATIII与血管内皮上的类肝素结构结合,并显示出增强对因子IXa,Xa和凝血酶的抑制。

ATIII也可以在补体级联中起作用。已经证明了ATIII与血清中的液相补体攻击复合物的结合。另外,补体的S蛋白(膜攻击复合物的抑制剂)干扰ATIII /凝血酶的相互作用。

通过肝素-琼脂糖亲和色谱法从新鲜的冷冻血浆中制备ATIII(3)。纯化的蛋白质以50%(体积/体积)甘油/水的形式提供,应储存在-20°C下。通过SDS-PAGE分析确定纯度。

 

凝胶Novex 4-12%Bis-Tris
加载人ATIII,每泳道1 µg
缓冲拖把
标准参见BluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脱氢酶(51 kDa),酒精脱氢酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌红蛋白红(19 kDa),溶菌酶(14 kDa)

 

本土化等离子体
血浆浓度150µg /毫升
行动方式丝氨酸蛋白酶抑制剂
分子量58,000(3)
消光系数
Ë
1%
1厘米,280海里
= 6.2(4)
等电点4.9-5.3(5)
结构体单链,三个链内二硫键(Cys 8-Cys 128,Cys 21-Cys95,Cys 239-Cys 422)(4),10%a-螺旋,30-40%b-结构,50%无规卷曲(5 ),易裂键(Arg 385-Ser 386)
碳水化合物百分比9%(5,7)

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