如果您曾经想知道生物系统的新陈代谢如何随着时间而变化,那么微量量热法可能是适合您的技术。传统上,只有少数具有特定专业知识的实验室能够进行微量量热法,但是,台式设备现在使几乎所有生物系统都具有现实的可能性。微量量热法可让您测量来自生物样品的热量(即新陈代谢)的很小变化。如果您可以在不使用昂贵标签的情况下以时间分辨的方式测量新陈代谢,则可以快速建立样品的新陈代谢指纹,从而洞悉它们在实验中的表现。在这里,我们探索已经使用Symcel微量热分析仪calScreener检查过的系统。
传统上,使用光密度读数来测量微生物的生长,光密度读数仅在细菌分裂或死亡时才发生变化。然而,微量量热法显示光密度读数隐藏了很多信息。通过测量呼吸微生物散发的热量,研究人员可以了解它们如何响应从环境压力到不同碳源的不同刺激。
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事实证明,抗生素以可预测的方式影响细菌细胞的代谢。细胞壁抑制剂具有一个特征,而蛋白质合成抑制剂具有另一个特征。这使得可以快速检查新药靶标的潜在作用方式,并大大减少了通常为确定抗微生物化合物的功能而必须进行的测试的范围。
除了深入了解功能外,微量量热法还可以用作在临床实验室中检测抗生素的小抑菌浓度的快速方法。细菌细胞对抗生素的代谢反应可以迅速显示出抗生素浓度是否有效。Symcel已参与一个泛欧洲项目,以验证此方法。
可以使用微量量热法测量2D细胞单层或复杂3D细胞培养物的代谢。利用诸如calScreener之类的机器中的时间分辨技术,可以准确地看到细胞层何时受药物影响或被微生物感染。与终点技术不同,时间分辨微量量热法*数据中的空白,显示了细胞反应的规模以及细胞是否恢复。
褐色脂肪细胞是负责从脂肪产生热量的细胞。至关重要的是,它们的代谢功能对于从肥胖到糖尿病的几种重要疾病至关重要。使用微量量热法研究棕色脂肪组织的研究人员已经能够生成棕色脂肪细胞的代谢指纹,以通过突变分析和化合物添加来了解参与棕色脂肪组织热生成的几种蛋白质的功能和重要性。这些重要的实验有助于理解和影响诸如糖尿病的疾病。
有些疾病太复杂而无法建模,但可以收集患者样本。对于这种情况,微量量热法非常适合活检。根据活检的大小,可以一次对许多活检进行检查,也可以将一项活检分开进行多种处理,以查看哪种活检有效。微量量热法已被用于筛选肿瘤活检组织,以寻求*的化学疗法选择。
通常,使用用于凋亡的分子标记物来筛选用于肿瘤学的抗体治疗不是很敏感。时间分辨微量量热法被证明具有更高的灵敏度,并且能够显示出肿瘤是否已经死亡或经过一轮治疗后是否能够复发。典型的筛选可能会错过这一点,表明实际上只有休眠的肿瘤才死亡,这延长了治疗和药物发现的时间。
微生物,活组织检查和细胞培养均可以使用微量量热法测量其代谢。诸如calScreener之类的台式设备使实时监控患者样本变得更加容易,从而为各个患者找到个性化的治疗方法。在许多情况下,微量热法也可以比传统方法更快地得出结果。
时间分辨微量量热法根据生物学系统和实验条件产生*的特征。这种*的特征使微量量热法成为诊断用途的强大工具,可作为传统方法的补充,或在某些情况下替代缓慢或困难的诊断方法。
疟疾也已在calScreener中进行了测量,当可以同步感染时,可以产生*结果。微量热法也已用于一些较罕见的热带寄生虫,研究人员能够观察到它们在宿主细胞之间的运动。测量这种运动的能力允许一些新颖的分析方法产生“无运动时间”参数,该参数可以用作药物发现的新指标。如果化合物可以延长无移动时间,则可能是一个有用的选择。
如果您的实验室进行突变研究,您将熟悉筛选和验证突变体所需进行的大量表型测定。微量量热法对许多表型筛选都有很多优势,或者可以用作强大的补充。随着时间的推移,根据细胞的新陈代谢活动,细胞的新陈代谢将成为唯yi的指纹的方式可以为突变体和/或途径的功能提供重要线索。
微量量热法是一种功能强大的技术,过去大多数实验室都无法使用。诸如calScreener之类的产品正在将微量热法带入生物学实验室,以便您可以更多地了解您的生物学系统。从寄生虫到细菌,如何在系统中使用它的例子很多。
这是否使您对系统的代谢输出感到好奇,并且想查看微量热量法是否可以工作?