色谱柱在生物化学、石油化工、食品工业、医药卫生、环保等领域应用很广。它除了用于定量和定性分析外,还能测定样品在固定相上的分配系数、活度系数、分子量等。下面就让我们来了解一下色谱柱吧。
色谱柱结构
在对色谱柱进行分类之前,我们有必要来了解一下,色谱柱的结构是怎么样的。
色谱柱由、筛板(滤片)、接头、柱管、压帽、卡套(密封环)螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成,压力不高于70kg/cm2时,也可采用厚壁玻璃或石英管,管内壁要求有很高的光洁度。为提高柱效,减小管壁效应,不锈钢柱内壁多经过抛光。也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度,其效果与抛光相同。还有使用熔融硅或玻璃衬里的,用于细管柱。色谱柱两端的柱接头内装有筛板,是烧结不锈钢或钛合金,孔径0.2~20μm(5~10&μm),取决于填料粒度,目的是防止填料漏出。
色谱柱种类
色谱柱的种类根据方法原理分为了气相色谱柱、高效液相色谱柱这两大类,同时还牵涉到有一些无机基质色谱填料、有机高分子类型液相色谱填料。下面主要说明一下两大类的分类特点。
气相色谱柱
核心是色谱柱,利用的方法是气相色谱法,亦称气体色谱法、气相层析法。气相色谱柱主要可分为填充气相色谱柱和毛细管气相色谱柱。气相色谱柱可按色谱柱的材料、形状、柱内径的大小和长度、固定液的化学性能等进行分类。根据固定液的化学性能,色谱柱又可分为非极性、极性与手性色谱分离柱等。
高效液相色谱柱
主要发生在色谱柱中的分离过程,均受热力学因素和动力学因素的控制。与所有其他色谱方法一样,色谱柱是进行液相色谱分离的核心部位。高效液相色谱柱可以按其分离模式,也可以按其分离的规模来进行分类。
若按色谱分离模式来分,大致可分为正相、反相、离子交换、疏水作用、体积排除、亲和以及手性等类型。依据相间的相对极性,可以将液相色谱分为正相和应相色谱。当固定相极性大于流动相极性时,称之为“正相”色谱;反之,当固定相极性小于流动相极性时,则称之为“反相”色谱。
按照分离的规模及柱子的几何参数,高效液相色谱柱可以分为制备柱、分析柱和微型柱三种类型,尺寸规格也不同:①常规分析柱(常量柱),内径2~5mm(常用4.6mm,国内有4mm和5mm),柱长10~30cm;②窄径柱(narrowbore,又称细管径柱、半微柱semi-microcolumn),内径1~2mm,柱长10~20cm;③毛细管柱(又称微柱microcolumn),内径0.2~0.5mm;④半制备柱,内径>5mm;⑤实验室制备柱,内径20~40mm,柱长10~30cm;⑥生产制备柱内径可达几十厘米。柱内径一般是根据柱长、填料粒径和折合流速来确定,目的是为了避免管壁效应